Войти
Микрофотография, показывающая некроз полосы сокращения, гистопатологическое обнаружение инфаркта миокарда (сердечный приступ). Гистопатология (соединение трех греческих слов: ἱστός histos «ткань», πάθος pathos «страдание» и -λογία -logia «исследование») относится к микроскопическому исследованию ткани с целью изучения проявлений болезни. В частности, в клинической медицине под гистопатологией понимается исследование биопсийного или хирургического образца патологом после того, как образец был обработан и гистологические срезы были размещены на предметных стеклах. Напротив, цитопатология исследует свободные клетки или тканевые микрофрагменты (как «клеточные блоки»).
Гистопатологическое исследование тканей начинается с хирургического вмешательства, биопсия или вскрытие. Ткань удаляется с тела или растения, а затем, часто после экспертного вскрытия в свежем состоянии, помещается в фиксатор, который стабилизирует ткани для предотвращения распад. Наиболее распространенным фиксатором является формалин (10% нейтральный буферный формальдегид в воде).
Затем ткань подготавливают для просмотра под микроскопом с использованием либо химической фиксации, либо замороженного среза.
Если предоставляется большая выборка, например После хирургической процедуры патологоанатом смотрит на образец ткани и выбирает ту часть, которая с наибольшей вероятностью даст полезный и точный диагноз - эта часть удаляется для исследования в процессе, обычно известном как сбор или разделение. Образцы большего размера вырезаются для правильного размещения их анатомических структур в кассете. Некоторые образцы (особенно биопсийные) можно предварительно замаскировать в агар, чтобы обеспечить правильную ориентацию ткани в кассете, а затем в блоке и затем на предметном стекле диагностической микроскопии. Затем его помещают в пластиковую кассету для большей части остальной части процесса.
Помимо формалина, были использованы другие химические фиксаторы. Но с появлением иммуногистохимии (ИГХ) окрашивания и диагностики молекулярной патологии на этих образцах, формалин стал стандартным химическим фиксатором в диагностической гистопатологии человека. Время фиксации для очень маленьких образцов короче, и существуют стандарты в диагностической гистопатологии человека.
Вода удаляется из образца на последовательных стадиях с использованием возрастающих концентраций спирта. Ксилол используется на последней стадии дегидратации вместо спирта - это связано с тем, что воск, используемый на следующей стадии, растворим в ксилоле, где он не находится в спирте, что позволяет воску проникать (проникать) в образец. Этот процесс обычно автоматизирован и выполняется в одночасье. Образец, пропитанный воском, затем переносят в отдельный контейнер для заделки образца (обычно металлический). Наконец, вокруг образца в контейнере вводится расплавленный воск, который охлаждается до затвердевания, чтобы поместить его в восковой блок. Этот процесс необходим для получения правильно ориентированного образца, достаточно прочного для получения тонких участков микротома для предметного стекла.
После того, как блок, залитый воском, будет готов, из него будут вырезаны секции и, как правило, они будут плавать на поверхности водяной ванны, которая расширяет секцию. Обычно это делается вручную и представляет собой квалифицированную работу (гистотехнолог), когда персонал лаборатории выбирает, какие части восковой ленты микротома с образцом поместить на предметные стекла. Несколько слайдов обычно готовятся на разных уровнях блока. После этого установленное предметное стекло тонкого среза окрашивают и на него надевают защитное покровное стекло. Для обычных пятен обычно используется автоматический процесс; но редко используемые окраски часто выполняются вручную.
Второй метод гистологической обработки называется обработкой замороженных срезов. Это высокотехнологичный научный метод, выполняемый обученным ученым-гистологом. В этом методе ткань замораживают и нарезают тонкими ломтиками с помощью микротома, установленного в холодильном устройстве с пониженной температурой, называемом криостатом. Тонкие замороженные срезы помещают на предметное стекло, немедленно и на короткое время фиксируют в жидком фиксаторе и окрашивают с использованием тех же методов окрашивания, что и традиционные срезы, залитые воском. Преимущества этого метода - быстрое время обработки, меньшая потребность в оборудовании и меньшая потребность в вентиляции в лаборатории. Недостаток - плохое качество финального слайда. Он используется при интраоперационной патологии для определений, которые могут помочь в выборе следующего этапа операции во время этого хирургического сеанса (например, для предварительного определения четкости границы резекции опухоли во время операции).
Это может быть сделано для слайдов, обработанных химической фиксацией или замороженных слайдов. Чтобы увидеть ткань под микроскопом, срезы окрашивают одним или несколькими пигментами. Целью окрашивания является выявление клеточных компонентов; Контрастные пятна используются для обеспечения контраста.
Наиболее часто используемый краситель в гистологии - это комбинация гематоксилина и эозина (часто сокращенно HE). Гематоксилин используется для окрашивания ядер синего, в то время как эозин окрашивает цитоплазму и матрикс внеклеточной соединительной ткани розовый . Существуют сотни различных других методов, которые использовались для выборочного окрашивания клеток. Другие соединения, используемые для окрашивания срезов тканей, включают сафранин, Oil Red O, congo red, соли серебра и искусственные красители. Гистохимия относится к науке об использовании химических реакций между лабораторными химическими веществами и компонентами тканей. Часто применяемым гистохимическим методом является реакция берлинской лазурной Перлза, используемой для демонстрации отложений железа при таких заболеваниях, как гемохроматоз.
В последнее время антитела стали использовать для окрашивания определенных белки, липиды и углеводы. Этот метод, получивший название иммуногистохимия, значительно расширил возможности специфической идентификации категорий клеток под микроскопом. Другие передовые методы включают гибридизацию in situ для идентификации конкретных молекул ДНК или РНК. Эти методы окрашивания антител часто требуют использования гистологии замороженных срезов. Эти процедуры, описанные выше, также выполняются в лаборатории под тщательным наблюдением и точностью квалифицированным медицинским лабораторным ученым (гистологом). Цифровые камеры все чаще используются для получения гистопатологических изображений.
Гистологические препараты исследуются под микроскопом патологом, квалифицированным медицинским специалистом, прошедшим признанную программу обучения. Этот медицинский диагноз сформулирован как отчет о патологии, в котором описываются гистологические данные и мнение патолога. В случае рака это представляет собой тканевую диагностику, необходимую для большинства протоколов лечения. При удалении рака патологоанатом указывает, очищена ли хирургическая граница или задействована (остаточная опухоль остается позади). Это делается с использованием метода обработки хлебный хлеб или CCPDMA. Микроскопические визуальные артефакты потенциально могут вызвать неправильный диагноз образцов.
После инфаркта миокарда (сердечного приступа) в первые ~ 30 минут гистопатология не обнаруживается. Единственный возможный признак первых 4 часов - это волнистость волокон на границе. Однако позже начинается коагуляционный некроз с отеком и кровотечением. Через 12 часов наблюдается кариопикноз и гиперэозинофилия миоцитов с некрозом полосы сокращения на краях, а также начало инфильтрации нейтрофилов. Через 1–3 дня продолжается коагуляционный некроз с потерей ядер и бороздок и усиленной инфильтрацией нейтрофилов в интерстиций. До конца первой недели после инфаркта начинается распад мертвых мышечных волокон, некроз нейтрофилов и начало удаления мертвых клеток макрофагами на границе, что увеличивает количество последующих дней. Через неделю также начинается формирование грануляционной ткани по краям, которая созревает в течение следующего месяца, увеличивается отложение коллагена и снижается клеточность до тех пор, пока рубцевание миокарда не станет полностью зрелым примерно через 2 месяца после инфаркта. 67>
 | Викискладе есть материалы, связанные с гистопатологией. |
