Войти
цитохром фотосистема I ацетил-СоА карбоксилаза rubisco тРНК тРНК фотосистема II тРНК тРНК фотосистема II рибосомные. белки тРНК тРНК наддегидрогеназа рибосомные белки репликация тРНК области происхождения тРНК малая РНК рибосомный белок области происхождения репликации рибосомная РНК тРНК рибосомная РНК тРНК цитохромы фотосистема II рибосомные белки фотосистема I цитохромы фотосистема II атр-синтаза тРНК наддегидрогеназа тРНК рибосомные белки фотосистема I тРНК фотосистема II РНК-полимераза рибосомный белок атр-синтаза тРНК рибосомный белок тРНК фотосистема II тРНК тРНК рибосомный РНК тРНК рибосома l РНК тРНК рибосомный белок фотосистема I наддегидрогеназа тРНК рибосомный белок наддегидрогеназа тРНК тРНК рибосомные белки фактор инициации 1 рибосомные белки РНК-полимераза атр-зависимая протеаза рибосомные белки тРНК nicotiana tabacum редактировать · изображение ДНК хлоропласта Интерактивная генная карта ДНК хлоропластов из Nicotiana tabacum. Сегменты с метками на внутренней стороне находятся на цепи B ДНК, сегменты с метками снаружи находятся на цепи A. Насечки указывают на интроны.Карты генов помогают описать пространственное расположение генов на хромосоме. Гены назначаются в определенное место на хромосоме, известное как локус, и могут использоваться в качестве молекулярных маркеров для определения расстояния между другими генами на хромосоме. Карты предоставляют исследователям возможность предсказать закономерности наследования конкретных признаков, что в конечном итоге может привести к лучшему пониманию признаков, связанных с заболеванием.
Генетическая основа генных карт заключается в предоставлении схемы, которая потенциально может помочь исследователи проводят секвенирование ДНК. Карта генов помогает указать относительное положение генов и позволяет исследователям находить интересующие области в геноме. Затем гены можно быстро идентифицировать и секвенировать быстро.
Два подхода к созданию генных карт включают физическое картирование и генетическое картирование. Физическое картирование использует методы молекулярной биологии для исследования хромосом. Эти методы, следовательно, позволяют исследователям непосредственно наблюдать хромосомы, чтобы можно было построить карту с относительными положениями генов. Генетическое картирование, с другой стороны, использует генетические методы, чтобы косвенно найти связь между генами. Методы могут включать эксперименты по скрещиванию (см. Гибрид (биология) ) и изучение родословных. Этот метод позволяет создавать карты, чтобы можно было анализировать относительное положение генов и других важных последовательностей.
Методы физического картирования, используемые для создания генной карты, включают: рестрикционное картирование, флуоресцентную гибридизацию in situ (FISH) и картирование сайтов с метками последовательностей (STS).
Рестрикционное картирование - это метод, в котором структурную информацию, касающуюся сегмента ДНК, получают с использованием рестрикционных ферментов. Рестрикционные ферменты - это ферменты, которые помогают разрезать сегменты ДНК в определенных последовательностях распознавания. В основе рестрикционного картирования лежит переваривание (или разрезание) ДНК рестрикционными ферментами. Затем расщепленные фрагменты ДНК наносят на агарозный гель с помощью электрофореза, который дает информацию о размере этих переваренных фрагментов. Размеры этих фрагментов помогают определить расстояние между сайтами рестрикционных ферментов на анализируемой ДНК и предоставляют исследователям информацию о структуре анализируемой ДНК.
FISH это метод, используемый для обнаружения присутствия (или отсутствия) последовательности ДНК в клетке. ДНК-зонды, специфичные для хромосомных участков или интересующих генов, помечены флуорохромами. Прикрепляя флуорохромы к зондам, исследователи могут одновременно визуализировать несколько последовательностей ДНК. Когда зонд входит в контакт с ДНК на определенной хромосоме, происходит гибридизация. Следовательно, будет получена информация о расположении этой последовательности ДНК. FISH анализирует одноцепочечную ДНК (оцДНК ). Как только ДНК переходит в одноцепочечное состояние, ДНК может связываться со своим специфическим зондом.
A сайт, помеченный последовательностью (STS), представляет собой короткую последовательность ДНК (примерно 100-500 пар оснований в длину), которая, как видно, появляется несколько раз в геноме человека. Эти сайты легко узнаваемы, обычно они хотя бы один раз появляются в анализируемой ДНК. Эти сайты обычно содержат генетические полиморфизмы, что делает их источниками жизнеспособных генетических маркеров (поскольку они отличаются от других последовательностей). Секвенированные сайты с тегами могут быть картированы в нашем геноме и требуют наличия группы перекрывающихся фрагментов ДНК. ПЦР обычно используется для сбора фрагментов ДНК. После создания перекрывающихся фрагментов можно проанализировать карту расстояния между STS. Чтобы рассчитать расстояние на карте между STS, исследователи определяют частоту, с которой происходят разрывы между двумя маркерами (см. секвенирование дробовика )
Генетическое картирование сосредоточено на принципах, впервые установленных Грегор Мендель. Этот подход в первую очередь ориентирован на анализ сцепления и методы ассоциации генов.
Основа для анализа сцепления - это понимание хромосомного положения и идентификация генов болезней. Определенные гены, которые сцеплены или связаны друг с другом, находятся рядом друг с другом на одной и той же хромосоме. Во время мейоза эти гены могут наследоваться вместе и могут использоваться в качестве генетический маркер, помогающий идентифицировать фенотип заболеваний. Поскольку анализ сцепления может выявить закономерности наследования, эти исследования обычно основаны на семейных исследованиях.
Анализ ассоциации генов основан на популяциях, а не на фокусе используется в шаблонах наследования, а скорее основан на всей истории популяции. Анализ ассоциации генов рассматривает конкретную популяцию и пытается определить, отличается ли частота аллеля у пораженных индивидуумов от таковой в контрольной группе здоровых особей той же популяции. Этот метод особенно полезен для выявления сложных заболеваний, которые не имеют модели менделевского наследования.
Используя методы, упомянутые выше, исследователи способен картировать гены болезней. Создание генной карты - важный первый шаг к идентификации генов болезней. Генные карты позволяют идентифицировать вариантные аллели и позволяют исследователям делать прогнозы относительно генов, которые, по их мнению, вызывают мутантный фенотип. Примером нарушения, идентифицированного с помощью анализа сцепления, является Муковисцидоз. Например, при муковисцидозе (CF) образцы ДНК из пятидесяти семей, затронутых CF, были проанализированы с использованием анализа сцепления. Сотни маркеров, относящихся к CF, были проанализированы по всему геному, пока CF не был идентифицирован на длинном плече хромосомы 7. Затем исследователи завершили анализ сцепления дополнительных ДНК-маркеров в хромосоме 7, чтобы определить еще более точное местоположение ген CF. Они обнаружили, что ген CF расположен около 7q31-q32 (см. хромосомную номенклатуру ).
