альбумин | |||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|
Идентификаторы | |||||||
Организм | Bos taurus (домашняя корова) | ||||||
Символ | ALB | ||||||
Entrez | 280717 | ||||||
HomoloGene | 105925 | ||||||
RefSeq (мРНК) | NM_180992 | ||||||
RefSeq (Prot) | NP_851335 | ||||||
UniProt | P02769 | ||||||
Другие данные | |||||||
Хромосома | 6: 91,54 - 91,57 Mb | ||||||
|
бычьего сывороточного альбумина (BSA или «фракция V» ) представляет собой белок сывороточного альбумина, полученный от коров. Он часто используется в качестве стандарта концентрации белка в лабораторных экспериментах.
Прозвище «Фракция V» относится к альбумину, являющемуся пятой фракцией первоначальной методики очистки Эдвина Кона, в которой использовались характеристики дифференциальной растворимости белков плазмы. Манипулируя концентрациями растворителя, pH, уровнями соли и температурой, Кон смог выделить последовательные «фракции» плазмы крови. Этот процесс был сначала коммерциализирован с человеческим альбумином для медицинского использования, а затем адаптирован для производства BSA.
Лиофилизированный альбумин бычьей сывороткиПолноразмерный белок-предшественник БСА имеет длину 607 аминокислот (АК). N-концевой сигнальный пептид с 18 остатками отрезается от белка-предшественника при секреции, следовательно, исходный белковый продукт содержит 589 аминокислотных остатков. Дополнительные шесть аминокислот расщепляются с образованием зрелого белка BSA, который содержит 583 аминокислоты.
Пептид | Положение | Длина (AA) | MW Da |
---|---|---|---|
Предшественник полной длины | 1-607 | 607 | 69,324 |
Сигнальный пептид | 1-18 | 18 | 2,107 |
Пропептид | 19-24 | 6 | 478 |
Зрелый белок | 25-607 | 583 | 66,463 |
Физические свойства БСА:
BSA имеет множество биохимических приложений, включая ELISA (иммуноферментный анализ), иммуноблоттинг и иммуногистохимия. Поскольку БСА представляет собой небольшой, стабильный, умеренно инертный белок, его часто используют в качестве блокатора в иммуногистохимии. Во время иммуногистохимии, которая представляет собой процесс, который использует антитела для идентификации антигенов в клетках, срезы тканей часто инкубируют с блокаторами BSA для связывания неспецифических участков связывания. Это связывание BSA с неспецифическими сайтами связывания увеличивает вероятность того, что антитела будут связываться только с интересующими антигенами. Блокатор БСА улучшает чувствительность за счет уменьшения фонового шума, поскольку участки покрыты умеренно нереактивным белком. Во время этого процесса минимизация неспецифического связывания антител важна для получения наивысшего отношения сигнал / шум. BSA также используется в качестве питательного вещества в культуре клеток и микробов. В рестрикционных перевариваниях BSA используется для стабилизации некоторых ферментов во время переваривания ДНК и для предотвращения адгезии фермента к реакционным пробиркам, наконечникам пипеток и другим сосудам. Этот белок не влияет на другие ферменты, которым он не нужен для стабилизации. BSA также обычно используется для определения количества других белков путем сравнения неизвестного количества белка с известным количеством BSA (см. анализ белка Брэдфорда ). BSA используется из-за его способности усиливать сигнал в анализах, его отсутствия эффекта во многих биохимических реакциях и его низкой стоимости, поскольку его можно легко очистить из бычьей крови, побочного продукта животноводства. Еще одно применение BSA заключается в том, что его можно использовать для временного выделения веществ, которые блокируют активность необходимого фермента, тем самым препятствуя полимеразной цепной реакции (ПЦР). БСА широко используется в качестве матрицы для синтеза наноструктур.
БСА также является основным компонентом фетальной бычьей сыворотки, обычной среды для культивирования клеток.