Протравы или краситель закрепляющий является веществом, используемым для набора (т.е. связывания) красители на ткани путем формирования координационного комплекса с красителем, который затем прикрепляется к ткани (или ткани). Его можно использовать для окрашивания тканей или для усиления пятен на клеточных или тканевых препаратах. Хотя протравы все еще используются, особенно небольшими партиями красителей, в промышленности они в значительной степени вытеснены директивами.
Термин протрава происходит от латинского mordere, «кусать». Раньше считалось, что протрава помогает красителю впитаться в волокно, чтобы оно прочно держалось во время стирки. Протравой часто является ион поливалентного металла, чаще всего хрома (III). Образующийся координационный комплекс красителя и иона является коллоидным и может быть кислотным или щелочным.
Морилки включают дубильной кислоты, квасцы, хром квасцы, хлорид натрия, и некоторые соли из алюминия, хрома, меди, железа, йод, калий, натрий, вольфрам и олово.
Йод часто называют протравой при пятнах по Граму, но на самом деле он является ловушкой.
Три метода протравливания:
Тип протравы влияет на оттенок, получаемый после окрашивания, а также на стойкость красителя. На применение протравы, будь то предварительная протрава, мета-протрава или пост-протрава, влияют:
Результаты окрашивания также могут зависеть от выбранной протравы, поскольку введение протравы в краситель окажет заметное влияние на окончательный цвет. Каждый краситель может по-разному реагировать на протраву. Например, кошениль алый или голландский алый, как его стали называть, использовали кошениль вместе с оловянной протравой для создания блестящего оранжевого оттенка красного.
Остаточная железная протрава может повредить ткань или побледнеть, вызывая «красильную гниль».
Лаковый краситель представляет собой нерастворимый комплекс, образованный при соединении красителя и протравы, который затем прикрепляется к подложке. Протравы увеличивают стойкость красителя, поскольку краситель с более высокой молекулярной массой теперь связан с волокном.
Тип используемой протравы может изменить цвет как раствора красителя с протравой, так и повлиять на оттенок конечного продукта.
В отличие от хлопка, шерсть очень восприимчива к протраве. Благодаря своей амфотерной природе шерсть с одинаковой эффективностью поглощает кислоты и щелочи. Когда шерсть обрабатывается металлической солью, она гидролизует соль до кислотного и основного компонента. Основной компонент абсорбируется по группе –COOH, а кислотный компонент удаляется во время промывки. Шерсть также имеет тенденцию поглощать мелкие осадки из растворов; они прилипают к поверхности волокон, а частицы красителя, прикрепленные к этим загрязнениям, приводят к плохой стойкости к истиранию.
Открытие конголезского красного в 1883 году, а затем и многих других синтетических азокрасителей, ознаменовало упадок протравных красителей.Как и шерсть, шелк амфотерен и может поглощать как кислоты, так и щелочи. Однако шерсть имеет тиогруппы (-SH) из аминокислоты цистина, которые действуют как восстанавливающий агент и могут восстанавливать шестивалентный хром дихромата калия до трехвалентной формы. Трехвалентный хром образует комплекс с волокном и красителем. Следовательно, дихромат калия нельзя эффективно использовать в качестве протравы.
В гистологии протравы незаменимы для закрепления красителей на тканях при микроскопическом исследовании.
Способы нанесения протравы зависят от желаемого красителя и исследуемых тканей; При необходимости используются методы пре-, мета- и пост-протравливания.
Наиболее часто используемым красителем, используемым в диагностической гистологии тканей животных, является гематоксилин Харриса как часть окраски гематоксилином и эозином (Hamp;E).