Войти
| Частица Хранилища | |||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
 Структура комплекса Хранилища из печени крысы. | |||||||||||
| Идентификаторы | |||||||||||
| Символ | Vault | ||||||||||
| Pfam | PF01505 | ||||||||||
| InterPro | IPR002499 | ||||||||||
| PROSITE | PDOC51224 | ||||||||||
| |||||||||||
Хранилище или сводчатый цитоплазматический рибонуклеопротеин представляет собой эукариотическую органеллу, функция которой полностью не изучена. Обнаруженные и выделенные Леонардом Римом в 1986 году своды представляют собой цитоплазматические органеллы, которые при негативном окрашивании и просмотре под электронным микроскопом напоминают арки сводчатого потолка собора с 39-кратным (или D39d) симметрия. Они присутствуют во многих типах эукариотических клеток и, по-видимому, являются высококонсервативными среди эукариот.
Хранилища - это большие рибонуклеопротеиновые частицы. Они примерно в 3 раза превышают размер рибосомы и весят приблизительно 13 M Да, они обнаруживаются в большинстве эукариотических клеток и всех высших эукариотах. Они измеряют 34 нм на 60 нм от отрицательного пятна, 26 нм на 49 нм от криоэлектронной микроскопии и 35 нм на 59 нм от СТЭМ. Хранилища состоят в основном из белков, что затрудняет окрашивание обычными методами. Структура белка состоит из внешней оболочки, состоящей из 78 копий белка главного свода (MVP) ~ 100 кДа . Внутри находятся два связанных белка хранилища, TEP1 и VPARP. TEP1, также известный как связанный с теломеразой белок 1, имеет массу 290 кДа, а VPARP (также известный как PARP4) связан с поли (АДФ-рибозой) полимеразой (PARP) и составляет 193 кДа. Хранилища высших эукариот также содержат одну или несколько небольших РНК хранилища (вРНК, также известных как втРНК) из 86–141 основания внутри.
Несмотря на то, что они не полностью выяснено, что своды были связаны с комплексами ядерных пор, и их восьмиугольная форма, кажется, подтверждает это. Своды вовлечены в широкий спектр клеточных функций, включая ядерно-цитоплазматический транспорт, локализацию мРНК, устойчивость к лекарствам, передачу сигналов клеток, сборку ядерных пор и врожденный иммунитет. Каждый из трех белков хранилища (MVP, VPARP и TEP1) был отключен у мышей индивидуально и в комбинации (VPARP и TEP1). Все мыши с нокаутом жизнеспособны, и серьезных фенотипических изменений не наблюдалось. Dictyostelium кодирует три разных MVP, два из которых были выбиты по отдельности или в комбинации. Единственным фенотипом, наблюдаемым у двойного нокаута Dictyostelium, была задержка роста в условиях пищевого стресса. Если хранилища вовлечены в важные клеточные функции, вполне вероятно, что существуют избыточные системы, которые могут уменьшить их потерю.
В конце 1990-х исследователи обнаружили, что хранилища (особенно MVP) были чрезмерно экспрессированы у раковых пациентов, которым был поставлен множественный лекарственный устойчивость, то есть устойчивость ко многим химиотерапевтическим видам лечения. Хотя это не доказывает, что увеличение количества хранилищ привело к лекарственной устойчивости, это все же намекает на какую-то причастность. Это имеет потенциал для обнаружения механизмов лекарственной устойчивости опухолевых клеток и улучшения противоопухолевых препаратов.
Хранилища были обнаружены у млекопитающих, земноводных, птицы и Dictyostelium discoideum. Модель Vault, используемая в базе данных Pfam, идентифицирует гомологов у Paramecium tetraurelia, Kinetoplastida, многих позвоночных, книдарий (морская ветреница ), моллюски, Trichoplax adhaerens, плоские черви, Echinococcus granulosus и Хоанофлагеллята.
Хотя своды наблюдались у многих видов эукариот, некоторые виды, по-видимому, не имеют рибонуклеопротеина. К ним относятся:
Эти четыре вида являются модельными организмами для растений, нематоды, генетика животных и грибы соответственно. Несмотря на эти исключения, высокая степень сходства хранилищ у организмов, у которых они есть, предполагает определенное эволюционное значение.
Лаборатория Рим в Калифорнийском университете в Лос-Анджелесе имеет сотрудничал с рядом групп, чтобы использовать систему бакуловирус для создания большого количества хранилищ. Когда главный белок хранилища (MVP) экспрессируется в клетках насекомых, частицы хранилища собираются на полирибосомах в цитоплазме. Используя молекулярно-генетические методы для модификации гена, кодирующего главный белок хранилища, были получены частицы хранилища с химически активными пептидами, присоединенными к их последовательности. Эти модифицированные белки встраиваются внутрь частицы хранилища без изменения ее основной структуры. Белки и пептиды также могут быть упакованы в хранилища путем присоединения упаковочного домена, полученного из белка VPARP. Был произведен ряд модифицированных частиц хранилища, чтобы проверить концепцию того, что хранилища могут быть сконструированы с помощью биотехнологии, чтобы их можно было использовать в широком спектре биологических приложений, включая доставку лекарств, биологические сенсоры, доставку ферментов, контролируемое высвобождение и восстановление окружающей среды.
Хранилище было упаковано с хемокином для потенциального использования для активации иммунной системы для борьбы с раком легких, и этот подход уже прошел стадию I. Испытания.
