Микросомы

редактировать

В клеточной биологии микросомы являются гетерогенными подобными пузырькам артефакты (диаметр ~ 20-200 нм), повторно сформированные из кусочков эндоплазматического ретикулума (ER), когда эукариотические клетки разрушаются в лаборатории; микросомы не присутствуют в здоровых живых клетках.

Микросомы можно сконцентрировать и отделить от других клеточных остатков с помощью дифференциального центрифугирования. Неразрушенные клетки, ядра и митохондрии осаждаются при 10 000 г, тогда как растворимые ферменты и фрагментированный ER, содержащий цитохром P450 (CYP), остаются в растворе ( g - ускорение свободного падения Земли). При 100000 g, достигаемой за счет более быстрого вращения центрифуги, ER осаждается из раствора в виде осадка, но растворимые ферменты остаются в супернатанте. Таким образом, цитохром P450 в микросомах концентрируется и выделяется. Микросомы имеют красновато-коричневый цвет из-за присутствия гема. Из-за необходимости в многочастной белковой системе микросомы необходимы для анализа метаболической активности CYP. Эти CYP очень распространены в печени крыс, мышей и людей, но также присутствуют во всех других органах и организмах.

Чтобы получить микросомы, содержащие специфический CYP или для высоких количеств активного фермента, микросомы получают из клеток насекомых Sf9 или в дрожжах посредством гетерологичной экспрессии. В качестве альтернативы также может быть осуществлена ​​экспрессия в Escherichia coli целых или усеченных белков. Таким образом, микросомы являются ценным инструментом для исследования метаболизма соединений (ингибирование ферментов, клиренс и идентификация метаболита ) и для изучения лекарственного взаимодействия с помощью in vitro исследований. Исследователи часто выбирают партии микросом на основе уровня ферментативной активности конкретных CYP. Некоторые партии доступны для изучения конкретных популяций (например, микросомы легких курильщиков и некурящих) или разделены на классификации для достижения целевых уровней активности CYP для исследований ингибирования и метаболизма.

Исследователи используют микросомы для имитации активности эндоплазматического ретикулума в пробирке и проводят эксперименты, требующие синтеза белка на мембране; они дают ученым возможность выяснить, как белки образуются в ER в клетке, воссоздав этот процесс в пробирке.

См. Также

Ссылки

Внешние ссылки

Последняя правка сделана 2021-05-30 10:16:16
Содержание доступно по лицензии CC BY-SA 3.0 (если не указано иное).
Обратная связь: support@alphapedia.ru
Соглашение
О проекте