Метод Гольджи

редактировать
Рисунок Камилло Гольджи гиппокампа, окрашенного методом нитрата серебра Рисунок клетки Пуркинье в коре мозжечка, сделанный Сантьяго Рамоном-и-Кахалем, наглядно демонстрирует возможности метода окрашивания Гольджи для выявления мелких деталей Пирамидный нейрон неокортекса человека, окрашенный методом Гольджи. Обратите внимание на апикальный дендрит, проходящий вертикально над сомой, и на многочисленные базальные дендриты, расходящиеся латерально от основания тела клетки.

Метод Гольджи является окрашиванием серебра метода, который используется для визуализации нервной ткани при световой микроскопии. Метод был открыт Камилло Гольджи, итальянским врачом и ученым, который опубликовал первое изображение, сделанное с помощью этой техники в 1873 году. Первоначально он был назван Гольджи черной реакцией ( la reazione nera ), но стал более известен как пятно Гольджи. или позже, метод Гольджи.

Окрашивание по Гольджи было использовано испанским нейроанатомом Сантьяго Рамоном-и-Кахалем (1852–1934), чтобы открыть ряд новых фактов об организации нервной системы, которые вдохновили рождение нейронной доктрины. В конечном итоге Рамон-и-Кахаль усовершенствовал технику, применив метод, который он назвал «двойной пропиткой». Техника окрашивания Рамона-и-Кахала, которая используется до сих пор, называется «Пятно Кахала».

Содержание
  • 1 Механизм
  • 2 Техника
  • 3 Цитата
  • 4 ссылки
  • 5 Внешние ссылки
Механизм

Клетки нервной ткани плотно упакованы, и если все клетки окрашены, можно получить мало информации об их структурах и взаимосвязях. Более того, тонкие нитевидные отростки нервных клеток, включая аксон и дендриты нейронов, слишком тонкие и прозрачные, чтобы их можно было увидеть с помощью обычных методов окрашивания. Метод Гольджи окрашивает ограниченное количество клеток случайным образом полностью. Механизм, с помощью которого это происходит, по большей части неизвестен. Дендриты, как и сома клеток, четко окрашены в коричневый и черный цвета, и их можно проследить по всей длине, что позволило нейроанатомам отслеживать связи между нейронами и делать видимыми сложную сетевую структуру многих частей головного и спинного мозга..

Окрашивание по Гольджи достигается пропиткой нервной ткани, фиксированной альдегидом, бихроматом калия и нитратом серебра. Клетки, таким образом, окрашенные заполнены микрокристаллизациями из хромата серебра.

Техника

Согласно SynapseWeb, это рецепт техники окрашивания Гольджи:

  1. Погрузите блок (приблизительно 10x5 мм) фиксированной формальдегидом (или перфузированной параформальдегидом - глутаральдегидом ) ткани мозга в 2% водный раствор дихромата калия на 2 дня.
  2. Вскоре просушите блок фильтровальной бумагой.
  3. Погрузите блок в 2% водный раствор нитрата серебра еще на 2 дня.
  4. Отрезать секции прибл. Толщина 20–100  мкм.
  5. Быстро обезвоживайте в этаноле, очистите и установите (например, в Depex или Enthalan).

С тех пор этот метод был усовершенствован для замены осадка серебра на золото путем погружения образца в хлорид золота, затем в щавелевую кислоту с последующим удалением серебра тиосульфатом натрия. Это сохраняет большую степень тонкой структуры с ультраструктурными деталями, отмеченными мелкими частицами золота.

Цитата

Рамон-и-Кахаль сказал о методе Гольджи:

Я выразил удивление, которое испытал, увидев собственными глазами чудесные разоблачающие силы реакции хром-серебро и отсутствие какого-либо ажиотажа в научном мире, вызванного ее открытием.
Recuerdos de mi vida, Vol. 2, Historia de mi labour científica. Мадрид: Моя, 1917, стр. 76.
Рекомендации
внешние ссылки
Последняя правка сделана 2023-08-08 03:39:26
Содержание доступно по лицензии CC BY-SA 3.0 (если не указано иное).
Обратная связь: support@alphapedia.ru
Соглашение
О проекте