Войти
Подготовка среза или срез мозга - это лабораторный метод в электрофизиологии, которая позволяет изучать синапс или нервную цепь изолированно от остальной части мозга в контролируемых физиологических условиях. Ткань головного мозга сначала разрезается с помощью тканевого слайсера, затем погружается в искусственную спинномозговую жидкость (aCSF) для стимуляции и / или записи. Этот метод обеспечивает более строгий экспериментальный контроль за счет устранения влияния остальной части мозга на интересующую цепь, тщательный контроль физиологических условий посредством перфузии субстратов через инкубационную жидкость для точного управления активностью нейромедиатора посредством перфузии агонистов и антагонистов. Однако усиление контроля сопровождается уменьшением легкости, с которой результаты могут быть применены ко всей нейронной системе.
Мозг мыши срезы, схематично При исследовании активности ЦНС млекопитающих подготовка срезов имеет несколько преимуществ и недостатков по сравнению с исследованием in vivo. Подготовка срезов быстрее и дешевле, чем подготовка in vivo, и не требует анестезии сверх первоначального умерщвления. Удаление ткани мозга из организма устраняет механические эффекты сердцебиения и дыхания, что позволяет осуществлять расширенную внутриклеточную запись. Физиологические условия образца, такие как уровни кислорода и углекислого газа или pH во внеклеточной жидкости, можно тщательно регулировать и поддерживать. Работа с срезами под микроскопом также позволяет аккуратно размещать регистрирующий электрод, что было бы невозможно в закрытой системе in vivo. Удаление ткани мозга означает отсутствие гематоэнцефалического барьера, который позволяет лекарствам, нейротрансмиттерам или их модуляторам или ионам перфузироваться по всей нервной ткани. Наконец, хотя цепь, выделенная в срезе мозга, представляет собой упрощенную модель цепи in situ, она поддерживает структурные связи, которые теряются в культурах клеток или гомогенизированной ткани.
. Однако подготовка среза также имеет некоторые недостатки. Наиболее очевидно, что в изолированном срезе отсутствуют обычные входные и выходные соединения, присутствующие во всем мозге. Кроме того, сам процесс нарезки может повредить ткань. Чтобы свести к минимуму осложнения в процессе нарезки, можно использовать более сложный резак для тканей, такой как Compresstome, тип вибрирующего микротома, используемого для максимального увеличения количества жизнеспособных клеток ткани. Кроме того, срез головного мозга может повредить верхнюю и нижнюю часть среза, но помимо этого процесс декапитации и извлечение мозга перед помещением среза в раствор может оказывать влияние на ткани, которые еще не понял. Во время записи ткань также «стареет», разлагаясь быстрее, чем у интактного животного. Наконец, искусственный состав раствора для купания означает, что присутствие и относительные концентрации необходимых соединений могут отсутствовать.
