Войти
Последовательная сканирующая электронная микроскопия торцевых поверхностей - это метод создания трехмерных изображений с высоким разрешением изображения из небольших образцов. Методика была разработана для тканей головного мозга, но она широко применима для любых биологических образцов. Серийный растровый электронный микроскоп с блочной поверхностью состоит из ультрамикротома, установленного внутри вакуумной камеры растрового электронного микроскопа. Образцы готовят методами, аналогичными методам просвечивающей электронной микроскопии (TEM ), обычно путем фиксации образца альдегидом, окрашивания тяжелыми металлами, такими как осмий и уран, а затем залитие эпоксидной смолой. Поверхность блока образца, залитого смолой, визуализируется путем обнаружения обратно рассеянных электронов. После получения изображения ультрамикротом используется для вырезания тонкого среза (обычно около 30 нм) с лицевой стороны блока. После того, как разрез вырезан, блок образца поднимается обратно в фокальную плоскость и снова отображается. Эта последовательность построения изображений, вырезания срезов и подъема блоков позволяет автоматически получать тысячи изображений с точным совмещением. Практическая серийная сканирующая электронная микроскопия плоских поверхностей была изобретена в 2004 году Винфридом Денком в Институте Макса Планка в Гейдельберге и коммерчески доступна в Gatan Inc., Thermo Fisher Scientific (VolumeScope) и ConnectomX.
Одним из первых приложений последовательной сканирующей электронной микроскопии связь аксонов в головном мозге. Разрешения достаточно, чтобы проследить даже самые тонкие аксоны и идентифицировать синапсы. К настоящему времени серийная блочная визуализация лица внесла свой вклад во многие области, такие как биология развития, биология растений, исследования рака, изучение нейродегенеративных заболеваний и т. Д. Методика позволяет генерировать чрезвычайно большие наборы данных и разрабатывать алгоритмы для автоматической сегментации Создание очень больших наборов данных все еще остается проблемой. Однако в настоящее время в этой сфере ведется большая работа. Проект EyeWire использует человеческие вычисления в игре для отслеживания нейронов через изображения объема сетчатки, полученные с помощью последовательной сканирующей электронной микроскопии лица.
Множество различных образцов. может быть подготовлен для серийной сканирующей электронной микроскопии поверхности блока, а ультрамикротом способен резать многие материалы, поэтому этот метод имеет более широкое применение. Он начинает находить применение во многих других областях, от клеточной биологии и биологии развития до материаловедения.
