Войти
Распространение, как один из отличительных признаков и наиболее фундаментальные биологические процессы в опухолях, связаны с прогрессированием опухоли, ответом на терапию и выживаемостью больных раком. Следовательно, оценка опухолевого индекса пролиферации (или фракции роста) имеет клиническое значение для характеристики многих солидных опухолей и гематологических злокачественных новообразований. Это побудило исследователей разработать различные технологии для оценки индекса пролиферации в образцах опухолей. Наиболее часто используемые методы оценки индекса пролиферации включают митотическое индексирование, тимидин -индекс мечения, анализ бромдезоксиуридина, определение доли клеток в различных фазах клеточный цикл и иммуногистохимическая оценка белков, связанных с клеточным циклом.
Митозы в нейроэндокринной опухоли.Митотическое индексирование - это самый старый метод оценки пролиферации и определяется путем подсчета количества митотических фигур (клеток, подвергающихся митоз) под световым микроскопом на окрашенных HE срезах. Обычно его выражают как количество клеток в поле микроскопа. Клетки в митотической фазе идентифицируются по типичному внешнему виду их хромосом в клетке во время митотической фазы клеточного цикла. Обычно количество митотических фигур выражается как общее количество в определенном количестве полей высокой мощности, например, 10 митозов в 10 полях высокой мощности. Поскольку область поля зрения может значительно различаться для разных микроскопов, необходимо определить точную область полей высокой мощности, чтобы сравнить результаты различных исследований. Соответственно, одной из основных проблем при подсчете митозов является воспроизводимость. Таким образом, потребность в стандартизированной методологии и строгих протоколах важна для достижения воспроизводимых результатов.
Индекс мечения тимидином определяется путем подсчета количества ядер опухоли, помеченных на Авторадиография срезов после инкубации опухолевых клеток с тимидином. Быстро пролиферирующие клетки легко обновляют больше радиоактивно меченного тимидина, что приводит к появлению более темных пятен на рентгенографической пленке.
Анализ на бромдезоксиуридин, аналогичный индексации с тимидином, инкубирует клетки с радиоактивно меченным бромдезоксиуридином, который поглощается с большей скоростью пролиферирующими клетками, а затем использует пленку для изображения распределения радиоактивно меченного бромдезоксиуридина в клетках.
Оценка гистограмм ДНК с помощью проточной цитометрии обеспечивает оценку фракций клеток в каждой из фаз клеточного цикла. Ядра клеток окрашивают пятном, связывающим ДНК, и степень окрашивания измеряют по гистограмме. Доли клеток в различных фазах клеточного цикла (отсеки G0 / G1, S и G2 / M) затем могут быть рассчитаны из гистограммы с помощью компьютерного анализа клеточного цикла.
Иммуногистохимическое определение белков, связанных с пролиферацией, таких как Ki-67 и ядерный антиген пролиферирующих клеток, является широко используемым методом определения индекса пролиферации. Ki-67 представляет собой ядерный антиген, экспрессируемый в пролиферирующих клетках, который кодируется геном MKI67 на хромосоме 10 и экспрессируется во время фаз GI, S, G2 и M клеточного цикла. Затем клетки окрашивают антителом Ki-67, и затем количество окрашенных ядер выражают в процентах от общего количества опухолевых клеток. Рекомендуется подсчитать не менее 500 опухолевых клеток в самой высокой маркированной области. Оценка Ki-67 тесно коррелирует с другими маркерами пролиферации и, как было показано, имеет прогностическую ценность для многих различных типов опухолей. Аналогично, ядерный антиген пролиферирующих клеток (PCNA) представляет собой белок, связанный с пролиферацией клеток, который активируется в пролиферирующих клетках, что делает его еще одним полезным антигеном для иммуноокрашивания. Он связан с ДНК-полимеразой альфа, которая экспрессируется на протяжении всех фаз клеточного цикла. Экспрессия PCNA также хорошо коррелирует с другими маркерами пролиферации, такими как количество митозов, фракция S-фазы и окраска Ki-67.
Различные методы характеристики индекса пролиферации нашли свою роль как в диагностической, так и в прогностической оценке опухолей. Например, количество митотических клеток используется для классификации опухолей. В целом, высокий индекс пролиферации предполагает злокачественность и опухоли высокой степени злокачественности. Среди солидных опухолей клиническое значение индекса пролиферации в отношении рака груди широко изучалось. Подсчет митотических клеток также показал в нескольких исследованиях прогностическую ценность при раке молочной железы, где более низкое количество митотических клеток коррелирует с более благоприятным исходом и, таким образом, было включено в систему гистологической оценки. Индекс маркировки Ki-67 также имеет прогностическое значение, поскольку во многих клинических практических руководствах рекомендуется оценка Ki-67 при впервые выявленных инвазивных карциномах молочной железы. Кроме того, индекс пролиферации опухоли использовался для прогнозирования ответа на системную химиотерапию у пациентов, получающих неоадъювантную системную терапию, когда пациенты с опухолями с высоким индексом пролиферации опухоли лучше реагируют на системную цитотоксическую терапию, чем пациенты, у которых есть опухоли с низким индексом пролиферации опухоли.
Эта статья включает общедоступный материал из документа Национального института рака США : «Словарь терминов по раку».
