Войти
Mycobacterium tuberculosis визуализация с использованием красителя Циля – Нильсена 
краситель Циля – Нильсена (кислотоустойчивый) - Схема основных этапов Окрашивание по Цилю-Нильсену - это тип кислотостойкого красителя, впервые представленный Полем Эрлихом. Окраска по Цилю – Нильсену - это бактериологический краситель, используемый для идентификации кислотоустойчивых организмов, в основном микобактерий. Он назван в честь двух немецких врачей, которые модифицировали окраску: бактериолога Франца Циля (1859–1926) и патолога Фридриха Нильсена (1854–1898).
Род Mycobacterium - это медленнорастущие бактерии, состоящие из небольших стержней, которые слегка изогнуты или прямые, и считаются грамм положительный. Некоторые виды микобактерий образуют ветви или нити. Некоторые микобактерии являются свободноживущими сапрофитами, но многие из них являются патогенами, вызывающими заболевания у животных и людей. Mycobacterium bovis вызывает туберкулез крупного рогатого скота. Поскольку туберкулез может передаваться людям, молоко пастеризуется для уничтожения любых бактерий. Некоторые виды микобактерий, вызывающих заболевания у людей, включают Mycobacterium leprae, Mycobacterium kansasii, Mycobacterium marinum, Mycobacterium bovis, Mycobacterium africanum и члены комплекса Mycobacterium avium. Mycobacterium tuberculosis - это вид Mycobacterium, вызывающий туберкулез (ТБ). Mycobacterium tuberculosis - это бактерия, передающаяся по воздуху, которая обычно поражает легкие человека. Симптомы туберкулеза включают сильный кашель, боль в груди, усталость, потерю веса, отсутствие аппетита, озноб, жар и ночную потливость. Типичная схема лечения латентной инфекции ТБ включает использование изониазида, рифапентина и рифампицина. Режим изменен для тех, у кого развился штамм туберкулеза с лекарственной устойчивостью. Обследование на туберкулез включает анализ крови, кожные пробы и рентген грудной клетки. При просмотре мазков на туберкулез он окрашивается кислотостойкой краской. Эти кислотоустойчивые организмы, такие как Mycobacterium, содержат большое количество липидных веществ в стенках своих клеток, называемых миколиновыми кислотами. Эти кислоты устойчивы к окрашиванию обычными методами, такими как окрашивание по Граму. Его также можно использовать для окрашивания некоторых других бактерий, таких как Nocardia. Реагенты, используемые для окрашивания по Цилю – Нильсену: - карбол фуксин, кислый спирт и метиленовый синий. Кислотоустойчивые бациллы после окрашивания становятся ярко-красными.
Окрашивание по Цилю-Нильсену представляет собой тип окраски от грибов с узким спектром действия. Пятна от грибка с узким спектром действия являются селективными и могут помочь дифференцировать и идентифицировать грибок. Результаты окрашивания по Цилю-Нильсену различны, поскольку многие клеточные стенки грибов не обладают кислотостойкостью. Пример распространенного типа кислотоустойчивого грибка, который обычно окрашивают с помощью окрашивания по Цилю-Нильсену, называется Histoplasma (HP). Гистоплазма содержится в почве и фекалиях птиц и летучих мышей. Люди могут заразиться гистоплазмозом при вдыхании спор грибов. Гистоплазма попадает в организм и попадает в легкие, где споры превращаются в дрожжи. Дрожжи попадают в кровоток и поражают лимфатические узлы и другие части тела. Обычно люди не заболевают от вдыхания спор, но если и заболевают, то обычно имеют симптомы гриппа. Другой вариант этого метода окрашивания используется в микологии для дифференциального окрашивания кислотоустойчивых отложений в кутикулярных гифах некоторых видов грибов из рода Руссула. Некоторые свободные эндоспоры можно спутать с небольшими дрожжами, поэтому окрашивание используется для идентификации неизвестных грибов. Он также полезен для идентификации некоторых простейших, а именно Cryptosporidium и Isospora. Окраска по Цилю – Нильсену также может затруднить диагностику в случае парагонимоза, поскольку яйца в образце мокроты на яйцеклетку и паразиты (OP) могут растворяться пятном, и часто используется в этой клинической обстановке, поскольку признаки а симптомы парагонимоза очень похожи на симптомы туберкулеза.
В 1882 году Роберт Кох открыл этиологию туберкулеза. Вскоре после открытия Коха Пауль Эрлих разработал краситель для микобактерий туберкулеза, получивший название окраска гематоксилином квасцов. Затем Франц Циль изменил технику окрашивания Эрлиха, применив карболовую кислоту в качестве протравы. Фридрих Нильсен оставил протраву, выбранную Цилем, но сменил первичную окраску на карбол-фуксин. Модификации Циля и Нильсена вместе разработали пятно Циля-Нильсена. Другой кислотоупорный сатин был разработан Джозефом Киньюном с использованием техники окрашивания по Цилю-Нильсену, но с исключением стадии нагревания из процедуры. Это новое пятно от киньюна было названо пятном киньюна.
Типичная процедура окрашивания AFB включает падение клеток в суспензии на предметное стекло, затем сушку жидкости воздухом и фиксацию клеток нагреванием.
| Краткое описание кислотостойкого красителя (краситель Циля – Нильсена) | |||||
|---|---|---|---|---|---|
| Применение | реагента | Цвет клеток | |||
| Кислотостойкость | Некислотная стойкость | ||||
| Первичный краситель | Карболфуксин | Красный | Красный | ||
| Обесцвечивающий агент | Кислотный спирт | Красный | Бесцветный | ||
| Контркрашивание | Метиленовый синий / малахитовый зеленый | Красный | Синий | ||
Исследования показали, что окрашивание AFB без культуры имеет низкую прогностическую ценность для отрицательного результата. Культуру КУБ следует проводить вместе с окрашиванием КУБ; это имеет гораздо более высокую отрицательную прогностическую ценность.
Механизм кислотостойкого окрашивания в кислотоустойчивых клетках и некислотных клетках. Первоначально карбол-фуксин окрашивает каждую клетку. Когда они очищаются кислотно-спиртовым раствором, окрашиваются только некислотостойкие бактерии, поскольку у них нет толстого воскового липидного слоя, как у кислотоустойчивых бактерий. Когда применяется контркрашивание, некислотные бактерии захватывают его и становятся синими (метиленовый синий) или зеленым (малахитовый зеленый) при просмотре под микроскопом. Кислотоустойчивые бактерии сохраняют карбол-фуксин, поэтому они кажутся красными.
СМИ, связанные с пятном Циля-Нильсена на Wikimedia Common s