Войти
Вирусная нагрузка, также известная как вирусная нагрузка, титр вируса или титр вируса, является числовым выражением количество вируса в данном объеме жидкости; мокрота и плазма крови являются двумя жидкостями организма. Например, вирусная нагрузка норовируса может быть определена по стоку воды с садовых продуктов. Норовирус не только продлевает вирусное выделение и обладает способностью выживать в окружающей среде, но и незначительная инфекционная доза требуется для заражения человека: менее 100 вирусных частиц.
Вирусная нагрузка часто выражается в виде вирусных частиц или инфекционных частиц на мл в зависимости от типа анализа. Более высокая вирусная нагрузка, титр или вирусная нагрузка часто коррелируют с серьезностью активной вирусной инфекции. Количество вируса / мл можно рассчитать, оценив количество живого вируса в пораженной жидкости. Например, его можно вводить в количестве РНК копий на миллилитр плазмы крови.
. Отслеживание вирусной нагрузки используется для мониторинга терапии во время хронических вирусных инфекций и у пациентов с ослабленным иммунитетом, таких как выздоравливающие после трансплантация костного мозга или солидного органа. В настоящее время доступно стандартное тестирование на ВИЧ -1, цитомегаловирус, вирус гепатита B и вирус гепатита C. Мониторинг вирусной нагрузки при ВИЧ представляет особый интерес для лечения людей с ВИЧ, поскольку это постоянно обсуждается в контексте управления ВИЧ / СПИДом.
Обзорное исследование 2010 г., проведенное Puren et al. классифицирует тестирование вирусной нагрузки на три типа: (1) тесты на основе нуклеиновых кислот амплификации (NAT или NAAT), коммерчески доступные в США с Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA) или на рынке Европейской экономической зоны (EEA) с маркировкой CE ; (2) «Домашнее пиво» или внутренние NAT; (3) тест, не основанный на нуклеиновых кислотах.
Существует множество различных молекулярных методов тестирования для количественной оценки вирусной нагрузки с использованием NAT. Исходный материал для амплификации можно использовать для разделения этих молекулярных методов на три группы:
ЭДТА плазма является хорошим источником бесклеточная вирусная РНК для тестирования вирусной нагрузки на основе РНК. Важно учитывать сбор, хранение образцов и меры биобезопасности. Для извлечения РНК из плазмы требуется специальное оборудование, реагенты и обучение, что делает его недоступным для средних и небольших лабораторий с ограниченными ресурсами. Большой образец (>1 мл плазмы) необходим для линейного диапазона, достигающего 50 копий / мл, что требует венепункции. Этот линейный диапазон лучше всего подходит для мониторинга лечения. Если более высокий линейный диапазон более 1000 копий / мл является приемлемым, палочка из пальца предоставит достаточный образец для диагностики ВИЧ-инфекции в младенчестве.
Плазма с ЭДТА может храниться при комнатной температуре в течение 30 часов, 14 дней при 4 ° C и продолжительных периодов времени при -70 ° C без значительного снижения сигнала вирусной нагрузки. Сообщается, что РНК в образцах крови меньшего размера, таких как сухие пятна плазмы (DPS) или сухие пятна крови (DBS) от палочек из пальца, стабильна при комнатной температуре в течение периодов от 4 недель до 1 года. Вирус инактивируется в высушенных образцах, что снижает опасность обращения с образцами. DBS и DPS были успешно оценены для тестирования вирусной нагрузки, но их линейный диапазон составляет 3 log10 или 4 log10 копий / мл. Из-за отсутствия чувствительности высушенные образцы полезны для скрининга на ВИЧ, но не для определения вирусной нагрузки.
Вирусная нагрузка обычно указывается в виде копий ВИЧ в миллилитре (мл) крови. Изменения вирусной нагрузки обычно регистрируются как изменение журнала (с точностью до 10). Например, увеличение вирусной нагрузки на три журнала (3 log10) - это увеличение в 10 или 1000 раз по сравнению с ранее сообщенным уровнем, в то время как снижение с 500000 до 500 копий будет падением на три журнала (также на 3 log10).
Различные методы тестирования часто дают разные результаты для одного и того же образца пациента. Для обеспечения сопоставимости один и тот же метод тестирования (амплификация мишени, специфическая амплификация зонда или амплификация сигнала) следует использовать каждый раз, когда исследуется образец пациента. В идеале тестирование пациента должно проводиться в одной и той же медицинской лаборатории с использованием одного и того же теста на вирусную нагрузку и анализатора. Время дня, усталость и стресс также могут влиять на значения вирусной нагрузки. Недавние прививки или инфекции могут повлиять на тест на вирусную нагрузку. Тестирование следует отложить как минимум на четыре недели после иммунизации или заражения.
