Войти
Окрашивание трихромом - это гистологический метод окрашивания, который использует два или более кислотные красители в сочетании с поликислотой. Окрашивание дифференцирует ткани, окрашивая их в контрастные цвета. Он увеличивает контраст микроскопических деталей в клетках и тканях, что облегчает их просмотр в микроскоп.
Слово трихром означает «три цвета». Первым протоколом окрашивания, который был описан как «трихром», было трихромное окрашивание Мэллори, которое дифференцированно окрашивало эритроциты в красный цвет, мышечную ткань в красный цвет, и коллаген до синего цвета. Некоторые другие протоколы окрашивания трихромом - это трихромное окрашивание Массона, трихромное пятно Лилли и трихромное окрашивание Гемери.
Без окрашивания трихромом отличить один элемент от другого может быть чрезвычайно сложно. Гладкую мышечную ткань, например, трудно отличить от коллагена. Пятно трихрома может окрасить мышечную ткань в красный цвет, а волокна коллагена - в зеленый или синий. Биопсия печени может иметь тонкие волокна коллагена между клетками печени, и количество коллагена может быть оценено на основании метода окрашивания. Методы трихрома в настоящее время используются, среди прочего, для дифференциации мышц от коллагена, альфа-клеток гипофиза от бета-клеток, фибрина от коллагена и митохондрий в свежезамороженных срезах мышц. Он помогает идентифицировать увеличение коллагеновой ткани (т.е. фиброзные изменения), например, при циррозе печени, и различать опухоли, возникающие из мышечных клеток и фибробластов.
Окрашивание трихромом. В методиках используются два или более кислотных красителя. Обычно кислотные красители окрашивают одни и те же основные белки, но, применяя их последовательно, можно изменить картину окрашивания. Поликислота (такая как фосфорномолибденовая кислота или вольфрамофосфорная кислота ) используется для селективного удаления красителя. Считается, что поликислоты ведут себя как красители с высокой молекулярной массой : они вытесняют легко удаляемый краситель из коллагена.
Обычно сначала наносят красный краситель в разбавленной уксусной кислоте, чтобы перекрашивать все компоненты. Затем применяется поликислота, чтобы удалить красный краситель с коллагена и некоторых других компонентов путем вытеснения. Наносится второй кислотный краситель (синий или зеленый) в разбавленной уксусной кислоте, который, в свою очередь, замещает поликислоту, в результате чего коллаген окрашивается в цвет, контрастирующий с исходным используемым красителем. Если эритроциты должны быть окрашены, перед окрашиванием красным красителем наносится желтый или оранжевый краситель с небольшой молекулярной массой. Обычно его наносят из насыщенного раствора в 80% этаноле и часто в сочетании с пикриновой кислотой (сам по себе краситель) и поликислотой. В методах используются незначительные различия в реакции тканей на красители, плотности, доступности и т. Д.
Трихромные пятна, в которых красители и поликислоты наносятся последовательно, называются многоступенчатыми трихромами. В «одностадийных» методах все красители - с поликислотой или без нее - объединяются в одном растворе. Одним из старейших одноэтапных подходов к окрашиванию трихромом является метод Ван Гизона, который окрашивает мышцы и цитоплазму в желтый цвет, а коллаген - в красный. Другой - трихромное пятно Гемёри, которое очень похоже на трихром Массона. В методах «yellowsolve» сначала наносится красный краситель в разбавленной уксусной кислоте, затем срез очень тщательно обезвоживается, чтобы гарантировать отсутствие влаги. Затем красный краситель заменяется желтым в растворителе, таком как целлозольв (2-этоксиэтанол). Название yellowsolve представляет собой смесь терминов желтый и cellosolve. Флоксин-тартразин Лендрума для клеточных включений является одним из примеров окрашивания желтым сольвом.
К красителям, используемым для окрашивания трихромом, относятся:
 | На Викискладе есть материалы, относящиеся к методам окрашивания при микроскопии. |
.
