Анализ белка Лоури

редактировать

Анализ белка Лоури - это биохимический анализ для определения общего уровня белка в растворе. Общая концентрация белка проявляется в изменении цвета раствора образца пропорционально концентрации белка, которую затем можно измерить с помощью колориметрических методов. Он назван в честь биохимика Оливера Х. Лоури, который разработал реагент в 1940-х годах. Его статья 1951 года с описанием этой техники - самая цитируемая статья в научной литературе, цитируемая более 300 000 раз.

СОДЕРЖАНИЕ
  • 1 Механизм
  • 2 См. Также
  • 3 ссылки
  • 4 Внешние ссылки
Механизм

Метод сочетает в себе реакции ионов меди с пептидными связями в щелочных условиях ( тест Биурета ) с окислением остатков ароматических белков. Метод Лоури основан на реакции Cu +, образующейся при окислении пептидных связей, с реагентом Фолин – Чокальтеу (смесь фосфорновольфрамовой кислоты и фосфорномолибденовой кислоты в реакции Фолина – Чокальтеу). Механизм реакции недостаточно хорошо изучен, но включает в себя уменьшение реагента Фолины-Чокальтеу и окисление из ароматических остатков ( в основном триптофан, а также тирозин ). Эксперименты показали, что цистеин также реагирует с реагентом. Следовательно, остатки цистеина в белке, вероятно, также вносят вклад в оптическую плотность, наблюдаемую в анализе Лоури. Результатом этой реакции является молекула интенсивного синего цвета, известная как гетерополимолибденовый синий. Концентрация восстановленного реагента Фолина (гетерополимолибденовый синий) измеряется по поглощению при 660 нм. В результате общая концентрация белка в образце может быть определена по концентрации остатков триптофана и тирозина, которые восстанавливают реагент Фолина-Чокальтеу.

Метод был впервые предложен в 1951 году Лоури бицинхониновой кислоты анализа и анализа Хартри-Лоури являются последующие модификации исходной Лоури процедуры.

Смотрите также
Рекомендации
  • Уокер, JM (2002). Справочник по белковым протоколам. Тотова, Нью-Джерси: Humana Press.
Внешние ссылки
 Protein Estimation using Lowry Method in Acube Lifesciences 
Последняя правка сделана 2024-01-10 06:19:22
Содержание доступно по лицензии CC BY-SA 3.0 (если не указано иное).
Обратная связь: support@alphapedia.ru
Соглашение
О проекте