Внутрицитоплазматическая инъекция сперматозоидов | |
---|---|
Цитоплазма ооцита инъецирована спермой во время ИКСИ | |
MeSH | D020554 |
[редактировать в Викиданных ] |
Внутрицитоплазматическая инъекция сперматозоидов (ИКСИ ) - это экстракорпоральное оплодотворение (ЭКО) процедура, при которой одна клетка сперматозоида вводится непосредственно в цитоплазму яйцеклетки. Этот метод используется для подготовки гамет для получения эмбрионов, которые могут быть перенесены в матку матери. При использовании этого метода реакция акросомы пропускается.
Классическое ЭКО и ИКСИ имеют несколько отличий. Однако шаги, которые необходимо выполнять до и после осеменения, одинаковы. Что касается оплодотворения, для ИКСИ требуется только одна сперматозоид на ооцит, в то время как для ЭКО требуется 50 000–100 000. Это связано с тем, что должна иметь место акросомная реакция, и тысячи сперматозоидов должны участвовать в ЭКО. После оплодотворения яйцеклетка превращается в проэмбрион, и ее необходимо перенести в матку, чтобы продолжить свое развитие.
Первая беременность у человека, вызванная ИКСИ, была проведена в 1991 году Джанпьеро Палермо и его командой.
Круглая инъекция сперматид (ROSI) - это метод вспомогательной репродукции, при котором круглая сперматида вводится в цитоплазму ооцита для достижения оплодотворения. Этот метод может быть использован для обеспечения генетического отцовства некоторым мужчинам, у которых нет сперматозоидов в эякуляте (азооспермия), и у которых сперматозоиды нельзя получить хирургическим путем из яичек. Это состояние называется необструктивной или секреторной азооспермией, в отличие от обструктивной азооспермии, при которой полное производство сперматозоидов действительно происходит в яичках, а потенциально оплодотворяющие сперматозоиды могут быть получены с помощью экстракции сперматозоидов из яичек (TESE) и использованы для ИКСИ. С другой стороны, в случаях необструктивной (секреторной) азооспермии производство сперматозоидов в яичках блокируется на разных этапах процесса образования сперматозоидов (сперматогенеза). У тех мужчин, у которых сперматогенез заблокирован на стадии круглых сперматид, у которых мейоз уже завершился, эти круглые клетки могут успешно оплодотворять ооциты после инъекции в их цитоплазму. До разработки методики ROSI мужчины с остановкой сперматогенеза на стадии круглой сперматиды могли иметь детей только с использованием донорских сперматозоидов.
Несмотря на то, что многие технические аспекты ROSI схожи с ICSI, между обоими методами также есть существенные различия. Во-первых, круглые сперматиды по сравнению со сперматозоидами не обладают легко различимыми морфологическими признаками и неподвижны. Следовательно, отличить круглые сперматиды от других круглых клеток аналогичного размера, таких как лейкоциты, является непростой задачей. Более того, различие между живыми круглыми сперматидами, которые будут использоваться в ROSI, и мертвыми круглыми сперматидами, которые необходимо выбросить, требует определенных методов и навыков, не требующихся в случае ИКСИ, где жизнеспособность сперматозоидов может быть легко оценена на основе сперматозоидов. моторика в большинстве случаев. Процедура микроинъекции для ROSI также немного отличается от процедуры ICSI, поскольку необходимы дополнительные стимулы для обеспечения правильной активации ооцитов после инъекции сперматид. Если все требования к отбору круглых сперматид и инъекции успешно выполнены, инъецированные ооциты развиваются в ранние эмбрионы и могут быть перенесены в матку матери, чтобы вызвать беременность.
Первые успешные беременности и роды с использованием ROSI были достигнутый в 1995 году Яном Тесариком и его командой. Клинический потенциал ROSI в лечении мужского бесплодия из-за полного отсутствия сперматозоидов недавно был подтвержден публикацией о постнатальном развитии 90 детей, родившихся в Японии и 17 - в Испании. На основании оценки родившихся детей не было выявлено никаких отклонений, связанных с техникой ROSI.
Эта процедура является чаще всего используется для преодоления мужского бесплодия, хотя он также может использоваться там, где в яйцеклетку не может легко проникнуть сперма, и иногда в дополнение к донорству спермы.
может использоваться в тератозооспермия, поскольку после оплодотворения яйцеклетки аномальная морфология сперматозоидов, по-видимому, не влияет на развитие бластоцисты или морфологию бластоцисты. Даже при тяжелой тератозооспермии микроскопия все еще может обнаружить несколько сперматозоидов, которые имеют «нормальную» морфологию, что обеспечивает оптимальную степень успеха.
Его также можно использовать при азооспермии, «Valious spermatozoa» (из журнала Fertility Preservation после рак, или из-за неудачного оплодотворения после ЭКО.
Первый ребенок, родившийся в результате микроманипуляции с гаметой (методика, в которой используются специальные инструменты и инвертированные микроскопы, которые помогают эмбриологам выбирать индивидуальный сперматозоид для ЭКО ИКСИ ) родился в Сингапуре в апреле 1989 года.
Методика была разработана Джанпьеро Палермо в Брюссельском университете Врие, в Центре репродуктивной медицины, возглавляемом Полом Девроем и. На самом деле, открытие было сделано по ошибке.
Сама процедура была впервые проведена в 1987 году, но только перешел в пронуклеарную стадию. Первый активированный с помощью ИКСИ эмбрион был получен в 1990 году, но первый успех Последние роды с помощью ИКСИ произошли 14 января 1992 г. после зачатия в апреле 1991 г.
Шарп и др. комментируют успехи ИКСИ с 1992 г., говоря: «[t] Таким образом, женщина несет бремя лечения для мужчин бесплодие, довольно уникальный сценарий в медицинской практике. Успех ИКСИ эффективно отвлек внимание от выявления причин мужского бесплодия и сосредоточил исследования на женщинах, чтобы оптимизировать выделение яйцеклеток и рецептивный эндометрий, от которых зависит успех ИКСИ ".
ИКСИ обычно выполняется после процедуры трансвагинального извлечения ооцитов для извлечения одного или нескольких ооцитов у женщины.
При ИКСИ ЭКО партнер или донор предоставляет образец спермы в тот же день, когда были взяты яйцеклетки. Образец проверяется в лаборатории, и, если сперматозоиды отсутствуют, врачи извлекают сперму из придатка яичка или яичка. Извлечение спермы из придатка яичка также известно как чрескожная аспирация сперматозоидов из придатка яичка (PESA), а также извлечение спермы из яичка. известная как аспирация сперматозоидов из яичек (TESA). В зависимости от общего количества сперматозоидов в образце спермы, низкого или высокого, его можно просто промыть или усилить с помощью всплытия или градиентов соответственно.
Медицинский a имитация все еще демонстрирует процедуру ИКСИ.Процедура выполняется под микроскопом с использованием нескольких устройств для микроманипуляции (микроманипулятор, микроинжекторы и микропипетки ). Удерживающая пипетка стабилизирует зрелый ооцит с помощью осторожного всасывания с помощью микроинъектора. С противоположной стороны тонкая полая стеклянная микропипетка используется для сбора одного сперматозоида, обездвиживая его, отрезая хвост острием микропипетки. Ооцит прокалывается через оолемму, и сперма направляется во внутреннюю часть ооцита (цитоплазму). Затем сперма попадает в ооцит. Изображенный ооцит имеет выдавленное полярное тельце около 12 часов, что указывает на его зрелость. Полярный корпус расположен в положении на 12 или 6 часов, чтобы вставленная микропипетка не повредила шпиндель внутри яйца. После процедуры ооцит будет помещен в культуру клеток и на следующий день проверен на предмет признаков оплодотворения.
Напротив, при естественном оплодотворении сперматозоиды конкурируют друг с другом, и когда первый сперматозоид проникает в оолемму, оолемма затвердевает, чтобы заблокировать попадание любой другой спермы. Высказывались опасения, что в ИКСИ этот процесс отбора сперматозоидов обходится, и сперма выбирается эмбриологом без какого-либо специального тестирования. Однако в середине 2006 года FDA одобрило устройство, которое позволяет эмбриологам отбирать зрелые сперматозоиды для ИКСИ на основе связывания сперматозоидов с гиалуронаном, основным компонентом слоя геля (cumulus oophorus ). окружающий ооцит. Устройство обеспечивает прикрепление микроскопических капель гиалуронанового гидрогеля к культуральной чашке. Эмбриолог помещает подготовленную сперму на микроточку, отбирает и улавливает сперму, которая связывается с точкой. Фундаментальные исследования созревания сперматозоидов показывают, что сперматозоиды, связывающие гиалуронан, являются более зрелыми и демонстрируют меньшее количество разрывов цепей ДНК и значительно более низкие уровни анеуплоидии, чем сперматозоиды, из которых они были отобраны. Торговая марка одного такого устройства для отбора спермы - PICSI. Недавнее клиническое испытание показало резкое снижение количества выкидышей с эмбрионами, полученными в результате отбора сперматозоидов PICSI.
В процессе могут использоваться «промытые» или «немытые» сперматозоиды.
Уровень живорождений значительно выше при использовании прогестерона до вспомогательной имплантации в циклах ИКСИ. Кроме того, добавление агониста GNRH, по оценкам, увеличивает частоту успеха.
Инъекция сперматозоидов со сверхвысоким увеличением (IMSI) не дает данных об увеличении частоты живорождений или выкидышей по сравнению со стандартным ICSI..
В новом варианте стандартной процедуры ИКСИ, называемом пьезо-ИКСИ, используются небольшие осевые механические импульсы (пьезоимпульсы) для снижения нагрузки на цитоскелет во время разрушения блестящей оболочки и оолеммы. Процедура включает в себя специальные пьезоэлектрические приводы, микрокапилляры и наполнитель для передачи механических импульсов на клеточные мембраны. Сама технология пьезо, например, была разработана для переноса животных ICSI и ES клеток.
Люди, которые неоднократно сталкивались с неудачной имплантацией, или экспериментальный эмбрион которых имеет толстую zona pellucida (покрытие) вокруг эмбриона, имеют идеальный кандидаты на вспомогательную штриховку зоны. Процедура включает создание отверстия в пояснице, чтобы повысить шансы нормальной имплантации эмбриона в матку.
ПГД - это процесс, в котором один или два клетки эмбриона на 3-й или 5-й день извлекаются и клетки подвергаются генетическому анализу. Идеальными кандидатами для этой процедуры являются пары с высоким риском аномального количества хромосом или имеющие в анамнезе дефекты одного гена или хромосомы. В настоящее время он используется для диагностики большого количества генетических дефектов.
Одной из областей, в которых может быть полезна инъекция спермы, является обращение вазэктомии. Однако потенциальные факторы, которые могут повлиять на частоту наступления беременности (и частоту живорождений) при ИКСИ, включают уровень фрагментации ДНК, измеренный, например, по анализу комет, пожилому возрасту матери и качеству спермы. Неясно, улучшает ли ИКСИ коэффициент живорождения или снижает риск выкидыша по сравнению с сверхвысоким увеличением (IMSI) отбором спермы.
Систематический метаанализ 24 оценок Повреждение ДНК на основе различных методов сделан вывод, что повреждение спермы ДНК отрицательно влияет на клиническую беременность после ИКСИ.
Есть некоторые предположения, что врожденные дефекты увеличиваются при использовании ЭКО в целом и ИКСИ в частности, хотя различные исследования показывают противоречивые результаты. В сводном документе с изложением позиции Практический комитет Американского общества репродуктивной медицины заявил, что считает ИКСИ безопасной и эффективной терапией мужского бесплодия, но может нести повышенный риск передачи отдельных генетических аномалий потомству либо через эту процедуру. сам по себе или из-за повышенного риска таких аномалий у родителей, проходящих процедуру.
Недостаточно доказательств того, что процедуры ИКСИ безопасны для женщин с гепатитом В в отношении вертикальной передачи потомству, поскольку пункция ооцита потенциально может способствовать вертикальной передаче потомству.
В дополнение к обычному дородовой уход, скрининг пренатальной анеуплоидии на основании возраста матери, сканирование затылочной прозрачности и биомаркеры. Однако биомаркеры беременностей, возникших в результате ИКСИ, кажутся измененными, что приводит к более высокому уровню ложноположительных результатов. Были разработаны поправочные коэффициенты, которые следует использовать при скрининге на синдром Дауна при одноплодной беременности после ИКСИ, но при двойных беременностях такие поправочные факторы полностью не выяснены. При исчезающих двойных беременностях со вторым гестационным мешком с мертвым плодом скрининг в первом триместре должен основываться исключительно на возрасте матери и сканировании затылочной прозрачности, поскольку в этих случаях биомаркеры значительно изменяются.
Викискладе есть средства массовой информации, связанные с внутрицитоплазматической инъекцией сперматозоидов. |