Войти
| Тест Кумбса | |
|---|---|
| MeSH | D003298 |
| MedlinePlus | 003344 |
A Тест Кумбса, также известный как антиглобулиновый тест (AGT ), представляет собой один из двух анализов крови, используемых в иммуногематологии. Это прямой и косвенный тесты Кумбса. Прямой тест Кумбса обнаруживает антитела, прилипшие к поверхности эритроцитов. Поскольку эти антитела иногда разрушают эритроциты, у человека может быть анемия, и этот тест может помочь прояснить состояние. Непрямой Кумбс обнаруживает антитела, которые свободно плавают в крови. Эти антитела могут действовать против определенных эритроцитов, и этот тест может быть проведен для диагностики реакций на переливание крови.
Прямой тест Кумбса используется для выявления аутоиммунной гемолитической анемии, т. Е. состояние, при котором иммунная система разрушает эритроциты, что приводит к анемии. Прямой тест Кумбса используется для обнаружения антител или белков комплемента, прикрепленных к поверхности эритроцитов. Для проведения теста берут образец крови и промывают эритроциты (удаляя собственную плазму пациента и несвязанные антитела из красных кровяных телец), а затем инкубируют с античеловеческим глобулином («реагент Кумбса»). Если затем эритроциты агглютинируют, прямой тест Кумбса дает положительный результат, что является визуальным признаком того, что антитела или белки комплемента связаны с поверхностью эритроцитов и могут вызывать разрушение этих клеток.
Непрямой тест Кумбса используется при пренатальном тестировании беременных женщин и при тестировании перед переливанием крови. Тест обнаруживает антитела против чужеродных эритроцитов. В этом случае сыворотка извлекается из образца крови, взятого у пациента. Сыворотку инкубируют с чужеродными эритроцитами известной антигенности. Наконец, добавляется античеловеческий глобулин. Если происходит агглютинация, непрямой тест Кумбса дает положительный результат.
Схема, показывающая прямой и непрямой тесты Кумбса. Два теста Кумбса основаны на антителах против человека связывание с человеческими антителами, обычно IgG или IgM. Эти антитела против человека продуцируются плазматическими клетками животных, не являющихся людьми, после иммунизации их плазмой человека. Кроме того, эти антитела против человека будут также связываться с человеческими антителами, которые могут быть зафиксированы на антигенах на поверхности эритроцитов (RBC). В соответствующих условиях пробирки это может привести к агглютинации эритроцитов и позволит визуализировать образующиеся скопления эритроцитов. Если наблюдается комкование, тест Кумбса положительный; в противном случае тест Кумбса отрицательный.
Обычные клинические применения теста Кумбса включают подготовку крови для переливания в перекрестном сопоставлении, атипичные антитела в плазма крови беременных женщин в рамках дородовой помощи и выявления антител для диагностики иммуноопосредованной гемолитической анемии.
тесты Кумбса выполняются с использованием эритроцитов или сыворотки (прямой или косвенной, соответственно) из образцов цельной венозной крови, взятых у пациентов с помощью венепункции. Венозная кровь отправляется в лабораторию (или банк крови), где обученный научно-технический персонал проводит тесты Кумбса. Клиническая значимость результата оценивается врачом, запросившим тест Кумбса, возможно, с помощью лабораторного гематолога.
Прямой тест Кумбса Тест, также называемый прямым антиглобулиновым тестом (DAT), используется для определения того, связаны ли антитела или факторы системы комплемента с эритроцитами поверхностными антигенами in vivo. DAT в настоящее время не требуется для тестирования перед переливанием крови, но может быть включен в некоторые лаборатории.
Прямой тест Кумбса используется в клинических условиях при иммуноопосредованной гемолитической анемии подозревается (опосредованное антителами разрушение эритроцитов). Положительный результат теста Кумбса указывает на то, что иммунный механизм атакует эритроциты пациента. Этим механизмом может быть аутоиммунитет, аллоиммунитет или лекарственно-индуцированный иммуноопосредованный механизм.
(запоминающее устройство, чтобы помнить, что DAT тестирует эритроциты и используется для тестирования младенцев на гемолитическую болезнь новорожденных: Rh Disease; R = эритроциты, D = DAT.)
Промывают эритроциты пациента (удаляя собственные сыворотка ), а затем центрифугировали с антиглобулином человека (также известным как реагент Кумбса). Если иммуноглобулин или факторы комплемента были зафиксированы на поверхности эритроцитов in-vitro, античеловеческий глобулин агглютинирует эритроциты, и прямой тест Кумбса будет положительным.. (Визуальное представление положительного прямого теста Кумбса показано в верхней половине схемы).
Непрямой тест Кумбса, также называемый непрямым тестом на антиглобулин (IAT), используется для выявления реакций антитело-антиген in vitro. Он используется для обнаружения очень низких концентраций антител, присутствующих в плазме / сыворотке пациента перед переливанием крови. В дородовой помощи IAT используется для скрининга беременных женщин на антитела, которые могут вызывать гемолитическую болезнь новорожденных. IAT также можно использовать для тестирования совместимости, идентификации антител, фенотипирования эритроцитов и исследований титрования.
Непрямой тест Кумбса используется для скрининга антител при приготовлении крови для переливания крови. Кровь донора и реципиента должна быть совместима с ABO и Rh D. Донорская кровь для переливания также проверяется на инфекции в отдельных процессах.
Образец крови реципиента и образец крови из каждой единицы крови донора проверяются на антитела с помощью непрямого теста Кумбса. Каждый образец инкубируют против широкого диапазона эритроцитов, которые вместе демонстрируют полный спектр поверхностных антигенов (то есть группы крови ).
Непрямой тест Кумбса используется для тестирования образца сыворотки реципиента на наличие антител против образца эритроцитов донора крови. Иногда это называется перекрестным сопоставлением крови.
Непрямой тест Кумбса используется для скрининга беременных женщин на IgG антитела, которые могут проходить через плацента в кровь плода и вызывает гемолитическую болезнь новорожденного.
IAT - это двухэтапный тест. (Перекрестное соответствие показано визуально в нижней половине схемы в качестве примера непрямого теста Кумбса).
Промытые эритроциты (RBC) с известными антигенами инкубируют с сывороткой пациента, содержащей неизвестное содержание антител. Если сыворотка содержит антитела к антигенам на поверхности RBC, антитела будут связываться с поверхностью RBC.
Эритроциты три или четыре раза промывают изотоническим физиологическим раствором, а затем инкубируют с антиглобулином человека. Если антитела связались с поверхностными антигенами эритроцитов на первом этапе, эритроциты будут агглютинировать при инкубации с глобулином против человека (также известным реагентом Кумбса) на этом этапе, и непрямой тест Кумбса будет положительным.
Разбавив сыворотку, содержащую антитела, можно определить количество антитела в сыворотке. Это делается путем использования удвоенных разведений сыворотки и определения максимального разведения исследуемой сыворотки, которое способно вызвать агглютинацию соответствующих эритроцитов.
Реагент Кумбса (также известный как антиглобулин Кумбса или антиглобулин человека ) используется как в прямом, так и в непрямом тесте Кумбса. контрольная работа. Реагент Кумбса - античеловеческий глобулин. Его получают путем инъекции человеческого глобулина животным, которые продуцируют поликлональные антитела, специфичные для человеческих иммуноглобулинов и факторов системы комплемента человека. Можно использовать более специфические реагенты Кумбса или моноклональные антитела.
Как IgM, так и IgG антитела прочно связываются со своими комплементарными антигенами. Антитела IgG наиболее реактивны при 37 ° C. Антитела IgM легко обнаруживаются в физиологическом растворе при комнатной температуре, поскольку антитела IgM способны соединяться между эритроцитами из-за своего большого размера, эффективно создавая то, что называется агглютинацией. Антитела IgG меньше по размеру и требуют помощи для достаточно хорошего мостика, чтобы сформировать визуальную реакцию агглютинации. Реагенты, используемые для усиления обнаружения IgG, называются потенциаторами. У эритроцитов есть чистый отрицательный заряд, называемый дзета-потенциалом, который заставляет их естественным образом отталкивать друг друга. Потенциаторы снижают дзета-потенциал мембран эритроцитов. Обычные потенциаторы включают раствор с низкой ионной силой (LISS), альбумин, полиэтиленгликоль (PEG) и протеолитические ферменты.
Тест Кумбса был впервые описан в 1945 г. кембриджскими иммунологами Робином Кумбсом (в честь которого назван), Артуром Мурантом и Робом Рейсом.. Исторически это делалось в пробирках. Сегодня это обычно делается с использованием микрочипов и гелевой технологии.
В книге Артура Хейли 1959 года «Последний диагноз» жена сотрудника больницы беременна; у нее резус-отрицательный, а у него резус-положительный. Он упоминает об этом и рекомендует провести непрямой тест Кумбса новому помощнику патологоанатома, который предполагает, что это очевидно, и даже подписывает форму заявки, чтобы заказать сыворотку Кумбса. Из-за чрезмерной скупости главного патолога он отвергает решение другого врача заказать сыворотку Кумбса и отказывается проводить непрямой тест Кумбса, вместо этого решая, что одних тестов на белок и физиологический раствор достаточно. Это решение приводит к трагическим последствиям. Эту историю рассказывает экранизация романа Молодые врачи 1961 года, но со счастливым концом.
