Войти
S. aureus использует коагулазу для образования фибриновой оболочки из фибриногена, присутствующего в кровотоке. Это помогает бактериям избежать обнаружения и фагоцитоза иммунной системой. Коагулаза - это белок фермент, продуцируемый несколькими микроорганизмами, который обеспечивает преобразование от фибриногена до фибрина. В лаборатории он используется для различения разных типов изолятов стафилококка. Важно отметить, что С. aureus обычно является коагулазо-положительным, что означает, что положительный тест на коагулазу указывает на присутствие S. aureus или любого из 11 других коагулаз-положительных стафилококков. Отрицательный тест на коагулазу вместо этого покажет присутствие коагулазонегативных организмов, таких как S. epidermidis или S. saprophyticus. Однако теперь известно, что не все S. aureus являются коагулазо-положительными.
Он также продуцируется Yersinia pestis.
. Коагулаза вступает в реакцию с протромбином в крови. Полученный комплекс называется стафилотромбином, который позволяет ферменту действовать как протеаза для преобразования фибриногена, белка плазмы, продуцируемого печенью, в фибрин. Это приводит к свертыванию крови. Коагулаза прочно связана с поверхностью бактерии S. aureus и может покрывать ее поверхность фибрином при контакте с кровью. Фибриновый сгусток может защитить бактерию от фагоцитоза и изолировать ее от других защитных механизмов хозяина. Следовательно, фибриновая оболочка может сделать бактерии более опасными. Связанная коагулаза является частью более крупного семейства белков адгезина MSCRAMM.
Коагулазный тест традиционно использовался для дифференциации Staphylococcus aureus от коагулазонегативных стафилококков. S.aureus продуцирует две формы коагулазы (т. Е. Связанную коагулазу и свободную коагулазу). Связанная коагулаза, иначе известная как «фактор слипания», может быть обнаружена путем проведения теста на коагулазу на предметном стекле, а свободная коагулаза может быть обнаружена с помощью теста на коагулазу в пробирке.
Тест слайдов на коагулазу проводится с отрицательным контролем, чтобы исключить аутоагглютинацию. Две капли физиологического раствора наносят на предметное стекло с номером образца, Test (T) и контролем (C). Две капли физиологического раствора эмульгируют с тестируемым организмом с помощью проволочной петли, прямой проволоки или деревянной палочки. Каплю плазмы (рекомендуется кроличья плазма, антикоагулированная ЭДТА ) помещают на каплю засеянного физиологического раствора, соответствующую тесту, и хорошо перемешивают, затем осторожно покачивают предметное стекло в течение примерно 10 секунд.
Если тест на коагулазу на слайдах отрицательный, в качестве подтверждения следует провести тест в трубке. Слипание обеих капель является признаком аутоагглютинации, поэтому следует провести тест через трубку. Пробирки не проводятся в каждом учреждении, но большая часть результатов зависит от лабораторных посевов крови.
Фибриновый сгусток, образованный в пробирке в результате реакции коагулазы В пробирке используется кроличья плазма, засеянная стафилококковой колонией ( т.е. грамположительные кокки, которые являются каталазой положительными). Затем пробирку инкубируют при 37 ° C в течение 1,5 часов. В случае отрицательного результата инкубацию продолжают до 18 часов.
