Calcofluor-white

редактировать

Calcofluor-white или CFW - это флуоресцентный синий краситель, который используется для связывания с Полисахаридные полимеры амебных цист. Он функционирует, будучи способным связываться с 1-3 бета и 1-4 бета po лизахариды хитина и целлюлозы, присутствующие в клеточных стенках грибов, растений и водорослей.

Флуоресцентное окрашивание дрожжей калькофлюоровым белком. Дрожжи имеют ярко-синий цвет клеточных стенок.

В исследованиях биологии растительных клеток они используются для окрашивания клеточных стенок обоих водорослей и высшие растения.. Он также полезен в медицине и биологии животных для идентификации грибов в ткани, (он связывается с хитином клеточных стенок грибов).

Содержание

  • 1 Использование
    • 1.1 Медицина
    • 1.2 Исследования
    • 1.3 Текстиль
  • 2 Флуоресценция
    • 2.1 Сравнительные исследования
  • 3 Проблемы с окрашиванием калькофлуор-белым
  • 4 Ссылки
  • 5 Внешние ссылки

Использование

Медицина

CFW может использоваться как в клинической микологии, так и в паразитологии. Свободноживущие амебы у окулярных видов могут иметь кисты, которые хорошо видны на пятне. Их видели на станциях для промывания глаз в лабораториях. CFW можно использовать с окрашиванием по Папаниколау, чтобы усилить реакцию дрожжей в мазках Папаниколау.

Исследования

В исследованиях калькофлуор-белый также используется для окрашивания шрамов почек дрожжевых клеток, поскольку Рубцы почек имеют более высокое содержание хитина, который окрашивает их больше, чем остальную клеточную мембрану. Благодаря этому красителю можно подсчитать рубцы почек, что является показателем возраста клетки. Он показывает такие же картины окрашивания, как и. Это особенно полезно для идентификации Mucor и возбудителей зигомикоза. Calcofluor-white можно использовать для окрашивания текальных пластинок в бронированных динофлагеллятах. Калькофлуор также используется в качестве красителя для одежды белого цвета, что дает характерный внешний вид при «черном освещении».

Текстиль

CFW - это краситель, осветляющий ткань. Сначала он водорастворим и бесцветен. Он обладает оптическим осветляющим эффектом, который использовался с 1940-х годов для придания более белого цвета текстилю. Его также добавляют в моющие средства для стирки в качестве осветлителя.

Флуоресценция

Поперечное сечение папоротника орла показывает ярко-зеленую и ярко-синюю флуоресценцию, наблюдаемую при CFW.

Водные растворы для калькофлуора -белые имеют спектр поглощения от 300 до 412 нм с пиком при 347 нм. Пик флуоресценции лучше всего проявляется при ультрафиолетовом свете, но фиолетовый / сине-фиолетовый также дает отличные результаты флуоресценции. Calcofluor-White - это флуоресцентный краситель, что означает, что он имеет длину волны возбуждения и длину волны излучения, которые отличаются друг от друга. Длина волны возбуждения составляет 380 нм, а длина волны излучения - 475 нм. Флуоресценцию лучше всего увидеть в ультрафиолетовом свете, но ее также можно увидеть в фиолетовом или сине-фиолетовом.

Грибы имеют тенденцию проявлять ярко-зеленый цвет в УФ / фиолетовом / фиолетово-синем свете из-за барьерных фильтров, используемых в микроскопии для флуоресценции. Calcofluor white должен тщательно интерпретировать окрашивание, так как некоторые неспецифические реакции могут сделать фон флуоресцентным желто-зеленым цветом. Это можно уменьшить, глядя на ячейки в синем свете или с помощью других фильтров, чтобы увидеть наилучшее возможное изображение. Синий Эванс является контрастным пятном для калькофлуорового белого, поскольку он может помочь уменьшить фоновые ткани и клетки с синим светом.

Сравнительные исследования

В сравнительном исследовании KOH, Calcofluor-White и грибковые культуры для диагностики грибкового онихомикоза, CFW рассматривались как наиболее чувствительный метод выявления инфекции у людей. Исследование показало, что из 150 пациентов CFW показал положительный результат у 95 из них. В исследовании также были рассмотрены ключевые преимущества использования красителя Calcofluor-White по сравнению с KOH. Обсуждается, что CFW требует быстрого скрининга, поскольку это можно увидеть на объективах с низким энергопотреблением и может быть выполнено в течение минуты, в то время как KOH требует около 3-4 минут для каждого слайда. Это более быстрый и более чувствительный метод скрининга, чем KOH, и исходный материал можно использовать с помощью CFC.

При исследовании методов диагностики микозов, грибковой инфекции у людей, CFW сравнивали с KOH и Chicago Sky Blue 6B. CFW показал положительный результат тестирования в 53,4% случаев с подозрением на микоз, в то время как Chicago Sky Blue 6B показал точность 55%. Исследование показало, что CFW менее эффективен для быстрого обнаружения по сравнению с Chicago Sky Blue 6B, но это эффективный способ обнаружения грибковой инфекции.

Исследование, в котором изучалось обнаружение Candida в раковых или предраковых поражениях. с использованием CFW с флуоресцентной микроскопией. В ходе исследования хотелось увидеть эффективность Calcofluor-White против разновидностей грибковых инфекций, которые могут вызвать смерть или серьезные травмы у пациентов с ослабленным иммунитетом. Он также исследовал чувствительность красителя по сравнению с окрашиванием по Граму и окрашиванием PAS. Исследование показало, что это быстрый и простой способ диагностики в цитопатологии и гистопатологии, но он был относительно дорогим. Исследование также показало, что для эффективного окрашивания не требуется специальных методов. Краситель также не мешает окрашиванию по PAS или Граму. Для цитологии Pap-CFW давал положительный ответ в 50 из 135 раз, а для гистопатологии он давал положительный ответ в 43 из 135 раз только для окрашивания CFW. Исследование показало, что окрашивание улучшилось при сочетании Пап и CFW. Результаты показали, что краситель был невероятно эффективным с точки зрения быстрой диагностики и эффективности, что делало его лучше по сравнению с грамположительными и PAS в этом конкретном исследовании. В целом, окраска имеет ключевые преимущества для исследовательских и диагностических целей, но она немного дороже и не может быть такой точной для определенных видов.

Проблемы с окрашиванием кальция в белый цвет

Были проведены исследования, показывающие, что CFW плохо флуоресцирует с Coccidioides immitis, несмотря на то, что это грибок. Histoplasma capsulatum и Cryptococcus neoformans также имеют тенденцию иметь проблемы с отображением флуоресценции CFW. В другом отчете отмечалось, что Pneumocystis carinii в биоптатах легких необходимо окрашивать при комнатной температуре в течение пяти минут, а затем при 65 ° C в течение пяти минут, чтобы лучше всего увидеть флуоресценцию. Флуоресценция темно-пигментированных грибов может привести к ошибочным результатам, так как это зависит от того, насколько пигментированы грибы и насколько хорошо работает окрашивание.

Ссылки

Внешние ссылки

.

Последняя правка сделана 2021-05-13 13:59:07
Содержание доступно по лицензии CC BY-SA 3.0 (если не указано иное).
Обратная связь: support@alphapedia.ru
Соглашение
О проекте