Войти
 Положительный тест Бенедикта | |
| Классификация | Колориметрический метод |
|---|---|
| Аналиты | Уменьшение сахара |
Реактив Бенедикта (часто называемый качественное решение Бенедикта или раствора Бенедикта) представляет собой химический реагент и сложную смесь карбоната натрия, цитрат натрия и меди (II) сульфата пентагидрата. Его часто используют вместо раствора Фелинга для определения присутствия редуцирующих сахаров. Наличие других редуцирующих веществ также дает положительный результат. Такие тесты, в которых используется этот реагент, называются тестами Бенедикта. Положительный результат теста с реактивом Бенедикта проявляется в изменении цвета с прозрачного синего на кирпично-красный с появлением осадка.
Как правило, тест Бенедикта обнаруживает присутствие альдегидов, альфа-гидроксикетонов и полуацеталей, в том числе тех, которые встречаются при определенных кетозах. Таким образом, хотя кетоз фруктоза не является строго восстанавливающим сахаром, оно представляет собой альфа-гидрокси-кетон и дает положительный результат тест, потому что база в реагенте преобразует его в альдозы глюкозы и манноз. Окисление редуцирующего сахара комплексом двухвалентной меди (Cu 2+) реагента приводит к образованию одновалентной меди (Cu +), которая осаждается в виде нерастворимого красного оксида меди (I) (Cu 2 O).
Он назван в честь американского химика Стэнли Росситера Бенедикта.
Реагент Бенедикта представляет собой темно-синий водный раствор. В каждом литре содержится:
Готовятся отдельные растворы реагентов. Сначала смешивают карбонат натрия и цитрат натрия, а затем медленно добавляют сульфат меди при постоянном перемешивании.
Цитрат натрия действует как комплексообразующий агент, который удерживает Cu 2+ в растворе, поскольку в противном случае он выпал бы в осадок. Карбонат натрия поддерживает щелочной раствор. В присутствии мягких восстановителей ион меди (II) восстанавливается до меди (I), которая осаждается в щелочных условиях в виде очень заметного красного оксида меди (I).
Чтобы проверить наличие моносахаридов и восстанавливающих дисахаридных сахаров в пище, образец пищи растворяют в воде и добавляют небольшое количество реагента Бенедикта. Во время водяной бани, которая обычно длится 4–10 минут, раствор должен переходить в синий цвет (без редуцирующего сахара), оранжевый, желтый, зеленый, красный, а затем выпадать кирпично-красный осадок или коричневый (при высокой концентрации редуцирующего сахара присутствует). Изменение цвета означало бы присутствие редуцирующего сахара.
| Эксперимент | Наблюдение | Вывод |
|---|---|---|
| Вещество в воде + 3 мл раствора Бенедикта, затем кипятить несколько минут и дать остыть. | Образуется красный, зеленый или желтый осадок. | Присутствует пониженный уровень сахара, например глюкозы. |
| Вещество в воде + 3 мл раствора Бенедикта, затем кипятить несколько минут и дать остыть. | Раствор остается прозрачным или немного синим | Уменьшение сахара нет |
Обычные дисахариды, лактоза и мальтоза, непосредственно обнаруживаются реактивом Бенедикта, поскольку каждый из них содержит глюкозу со свободным восстанавливающим альдегидным фрагментом после изомеризации.
Сахароза (столовый сахар ) содержит два сахара (фруктозу и глюкозу), соединенные их гликозидной связью таким образом, чтобы предотвратить изомеризацию глюкозы в альдегид или фруктозу в форму альфа-гидроксикетона. Таким образом, сахароза является невосстанавливающим сахаром, который не вступает в реакцию с реактивом Бенедикта. Однако сахароза косвенно дает положительный результат с реактивом Бенедикта при нагревании с разбавленной соляной кислотой перед тестом, хотя она модифицируется во время этой обработки, поскольку кислотные условия и нагревание разрывают гликозидную связь в сахарозе посредством гидролиза. Продуктами разложения сахарозы являются глюкоза и фруктоза, которые могут быть обнаружены реагентом Бенедикта, как описано выше.
Крахмалы не реагируют или очень плохо реагируют с реагентом Бенедикта из-за относительно небольшого количества фрагментов восстанавливающего сахара, которые встречаются только на концах углеводных цепей. Другие углеводы, которые дают отрицательный результат, включают инозитол.
Реагент Бенедикта также можно использовать для проверки наличия глюкозы в моче, повышенный уровень которой известен как глюкозурия. Глюкозурия может указывать на сахарный диабет, но тест Бенедикта не рекомендуется и не используется для диагностики вышеупомянутого состояния. Это связано с возможностью реакции, при которой присутствие других восстанавливающих веществ, таких как аскорбиновая кислота, лекарства ( леводопа, контраст, используемый в радиологических процедурах) и гомогентизиновая кислота ( алкаптонурия ), создает ложноположительный результат.
Поскольку по цвету полученного осадка можно сделать вывод о количестве сахара, присутствующего в растворе, тест является полуколичественным. Зеленоватый осадок указывает на концентрацию около 0,5 г%; желтый осадок указывает на концентрацию 1 г%; оранжевый означает концентрацию 1,5 г%; красный цвет указывает на концентрацию 2 г% или выше.
Количественный реагент Бенедикта содержит тиоцианат калия и используется для количественного определения концентрации редуцирующих сахаров. Этот раствор образует осадок тиоцианата меди белого цвета, который можно использовать для титрования. Титрование следует повторить с 1% раствором глюкозы вместо образца для калибровки.
Чистая реакция между альдегидом (или альфа-гидроксикетоном ) и ионами меди (II) в растворе Бенедикта может быть записана как:
Ионы гидроксида в уравнении образуются, когда карбонат натрия растворяется в воде. С включенным цитратом реакция становится:
Другие окисляющие реагенты
Другие восстанавливающие реагенты
