Использует | Микробиологический посев. Art |
---|---|
Сопутствующие товары | Чашка Петри. Среда для выращивания |
Пластина с агаром представляет собой чашку Петри, которая содержит агар в качестве твердой питательной среды плюс питательные вещества, используемые для культивирования микроорганизмов. Иногда для воздействия на рост добавляют селективные соединения, такие как антибиотики.
96 пиннер, используемый для проведения точечных анализов дрожжевых, грибковых или бактериальных клетокОтдельные микроорганизмы, помещенные на планшет, вырастают в отдельные колонии, каждый из которых представляет собой клон, генетически идентичный индивидуальному предку (за исключением низкой, неизбежной скорости мутации ). Таким образом, планшет можно использовать либо для оценки концентрации организмов в жидкой культуре, либо для подходящего разведения этой культуры с использованием счетчика колоний, либо для создания генетически чистых культур из смешанная культура генетически разных организмов.
Доступно несколько методов для отсеивания клеток. Один метод известен как «штриховка ». В этом методе капля культуры на конце тонкой стерильной петли проволоки, иногда называемой инокулятором, наносится штрихами по поверхности агара, оставляя организмы позади, большее число на начало полосы и меньшее число в конце. В какой-то момент во время успешной «полоски» количество депонированных организмов будет таким, что отдельные отдельные колонии будут расти в этой области, которую можно удалить для дальнейшего культивирования с использованием другой стерильной петли. Крайне важно работать в условиях стерильности, чтобы предотвратить загрязнение чашек.
Еще один способ посева организмов, помимо штриховки, на чашки с агаром - это точечный анализ. Этот тип анализа часто используется для проверки жизнеспособности клеток и выполняется с помощью пиннеров (часто также называемых лягушками). Третий используемый метод - использование стерильных стеклянных шариков для высева клеток. В этом методе клетки выращивают в жидкой культуре, небольшой объем которой наносится пипеткой на чашку с агаром, а затем распределяется вместе с шариками. Посев реплик - это еще один метод высева клеток на чашки с агаром. Эти четыре метода являются наиболее распространенными, но возможны и другие. Крайне важно работать в стерильных условиях, чтобы предотвратить загрязнение чашек с агаром. Таким образом, посев часто проводят в камере с ламинарным потоком или на рабочем столе рядом с горелкой Бунзена.
В 1881 году Фанни Хессе, которая работала техником у своего мужа Вальтера Гессе в лаборатории Роберта Коха, предложила агар в качестве эффективного средства
Как и другие питательные среды, составы агара, используемые в чашках, могут быть классифицированы как «определенные» или «неопределенные»; определенная среда синтезируется из отдельных химических веществ, необходимых организму, поэтому известен точный молекулярный состав, в то время как неопределенная среда производится из натуральных продуктов, таких как дрожжевой экстракт, где точный состав неизвестен.
Чашки с агаром могут быть сформулированы как разрешающие, с целью обеспечения роста любых присутствующих организмов, так и ограничительные или селективные, с целью обеспечения роста только определенной подгруппы этих организмов. Это может принимать форму потребности в питании, например, предоставление определенного соединения, такого как лактоза, в качестве единственного источника углерода и, таким образом, выбор только организмов, которые могут метаболизировать это соединение, или путем включения определенного антибиотика или другого вещества для отбора только организмов, устойчивых к этому веществу. Это до некоторой степени коррелирует с определенными и неопределенными медиа; Неопределенные среды, изготовленные из натуральных продуктов и содержащие неизвестную комбинацию очень многих органических молекул, обычно более терпимы с точки зрения удовлетворения потребностей более широкого круга организмов, в то время как определенные среды могут быть точно адаптированы для отбора организмов с конкретными свойствами.
Чашки с агаром также могут быть индикаторными чашками, в которых организмы отбираются не на основе роста, а вместо этого отличаются изменением цвета в некоторых колониях, обычно вызванным действием фермента . на некоторое соединение, добавленное в среду.
Планшеты инкубируют от 12 часов до нескольких дней в зависимости от выполняемого теста.
Некоторые часто используемые типы чашек с агаром:
Эритроциты на чашках с агаром используются для диагностики инфекции. Слева - положительная инфекция Staphylococcus, справа - положительная культура Streptococcus.Пластины с кровяным агаром (БАТ) содержат кровь млекопитающих (обычно овцу или лошадь), обычно в концентрации 5 –10%. BAP - это обогащенная дифференциальная среда, используемая для выделения требовательных организмов и обнаружения гемолитической активности. Β-Гемолитическая активность показывает лизис и полное переваривание содержимого красных кровяных телец, окружающих колонию. Примеры включают Streptococcus haemolyticus. Α-Гемолиз вызывает только частичный лизис эритроцитов (клеточная мембрана остается неповрежденной) и будет выглядеть зеленым или коричневым из-за преобразования гемоглобина в метгемоглобин. Примером этого может быть Streptococcus viridans. γ-Гемолиз (или негемолитический) - это термин, относящийся к отсутствию гемолитической активности. БАТ также содержат мясной экстракт, триптон, хлорид натрия и
Шоколадный агар тип чашки с кровяным агаром, в котором клетки крови были л ysed путем нагревания ячеек до 56 ° C. Он используется для выращивания привередливых респираторных бактерий, таких как Haemophilus influenzae. На самом деле в тарелке нет шоколада ; он назван только по окраске.
представляет собой тип обогащенной кровью микробиологической культуральной среды. Поскольку он обогащен, он способствует росту некоторых требовательных бактерий и позволяет определять гемолитическую активность этих бактериальных культур.
Агар Тайера-Мартина представляет собой шоколадный агар, предназначенный для выделения Neisseria gonorrhoeae.
Тиосульфат-цитрат агар с подвижными солями и сахарозой усиливает рост Vibrio spp., включая Vibrio cholerae.
Различные специфические типы агара:
В Wikibook School Science есть страница по теме: Agar plate |
На Викискладе есть материалы, связанные с Чашки с агаром. |