Физические свойства некоторых бактериальных и эукариотических клеток
Mycobacterium tuberculosis (окрашены в красный цвет) в ткани (синий).
Кислотостойкость- это физическое свойство некоторых бактериальных и эукариотических клеток, а также некоторых субклеточных структур, в частности их устойчивость к обесцвечиванию кислотами во время лабораторного окрашивания Процедуры. Окрашенные как часть образца, эти организмы могут противостоять процедурам обесцвечивания на основе кислоты и / или этанола, которые обычно используются во многих протоколах окрашивания, отсюда и название кислотостойкие.
Механизмы кислотостойкости различаются в зависимости от вида , хотя наиболее известным примером является род Mycobacterium, который включает виды, ответственные за туберкулез и проказу. Кислотостойкость микобактерий обусловлена высоким содержанием миколиновой кислоты в их клеточных стенках, что отвечает за характер окрашивания: плохое всасывание с последующим высоким удерживанием. Некоторые бактерии также могут быть частично кислотоустойчивыми, например, Nocardia.
Кислотоустойчивые организмы трудно охарактеризовать с помощью стандартных микробиологических методов, хотя их можно окрашивать с помощью концентрированных красителей, особенно когда процесс окрашивания сочетается с нагреванием.. Некоторые, например микобактерии, могут быть окрашены красителем по Граму, но они плохо воспринимают кристаллический фиолетовый и поэтому выглядят светло-фиолетовыми, что потенциально может привести к неправильной грамположительной идентификации.
Наиболее распространенным методом окрашивания, используемым для идентификации кислотоустойчивых бактерий, является окрашивание по Цилю-Нильсену, при котором кислотоустойчивые виды окрашиваются в ярко-красный цвет и четко выделяются на синем фоне. Другой метод - это метод Киньюна, при котором бактерии окрашиваются в ярко-красный цвет и четко выделяются на зеленом фоне. Кислотоустойчивые микобактерии также можно визуализировать с помощью флуоресцентной микроскопии с использованием специфических флуоресцентных красителей (например, аурамин-родаминового красителя ). Яйца паразитической легочной двуустки Paragonimus westermani фактически разрушаются пятном, что может затруднить диагностику пациентов с симптомами, подобными туберкулезу.
Содержание
- 1 Некоторые методы кислотостойкого окрашивания
- 2 Известные кислотоустойчивые структуры
- 3 Ссылки
- 3.1 Примеры онлайн-протоколов
Некоторые методы кислотостойкого окрашивания
- Ziehl – Neelsen Пятно (классический и модифицированный типы отбеливателя)
- Пятно киньюна
- Для людей с дальтонизмом (или на фоне, где трудно обнаружить красные бактерии) Victoria blue можно заменить на карбол фуксин и пикриновая кислота можно использовать в качестве противокрасителя вместо метиленового синего, а также можно использовать остальную технику киньюна.
- Различные методы окрашивания бактериальных спор с использованием Kenyon, например
- Метод Меллера
- Метод Дорнера (кислотно-спиртовой обесцвечивающий агент) без модификации Шеффера – Фултона (обесцвечивание водой)
- Метод моющего средства с использованием Тергитола 7, неионогенного полигликоля эфир поверхностно-активные вещества типа NP-7
- (без фенола / карболовой кислоты)
- краситель аурамин-родаминовый
- аурамин-фенольный краситель
заметные кислотоустойчивые структуры
Очень мало структур кислотоустойчивый; это делает окрашивание на кислотостойкость особенно полезным в диагностике. Ниже приведены известные примеры кислотостойких или модифицированных кислотоустойчивых структур:
- Все микобактерии - M. tuberculosis, M. leprae, M. smegmatis и атипичные Mycobacterium
- Actinomycetes (особенно некоторые аэробные) с миколовой кислотой в клеточной стенке (обратите внимание, у Streptomyces НЕТ); не путать с Actinomyces, который представляет собой некислотоустойчивый род актиномицетов
- Nocardia (слабо кислотоустойчивый; сопротивляется обесцвечиванию при более низких концентрациях кислоты)
- Rhodococcus
- Гордония (актиномицет)
- Tsukamurella
- Dietzia
- Голова сперматозоидов
- Бактериальные споры, см. Эндоспоры
- Legionella micdadei
- Определенные клеточные включения, например
- Цитоплазматические тельца включения, наблюдаемые в
- Ядерные тельца включения, наблюдаемые в
- Отравление свинцом
- Отравление висмутом.
- Ооцисты некоторых кокцидий паразитов в фекалиях, таких как:
- Несколько других паразитов:
- Sarcocystis
- Taenia saginata яйца хорошо окрашиваются, но Taenia solium яйца не окрашиваются (можно использовать для различения)
- Эхинококкоз, особенно их «крючки» нерегулярно окрашиваются красителем ZN, но излучают ярко-красную флуоресценцию в зеленом свете и могут способствовать обнаружению на умеренно тяжелом фоне или с редкими крючками.
- Формы грибковых дрожжей окрашиваются непостоянно Кислотостойкое окрашивание, которое считается окрашиванием узкого спектра для грибов. В исследовании кислотоустойчивости грибов 60% бластомицетов и 47% гистоплазмы показали положительное цитоплазматическое окрашивание th дрожжеподобные клетки, криптококк или кандида не окрашивались, и очень редко наблюдалось окрашивание эндоспор Coccidioides.
Ссылки
Примеры онлайн-протоколов
