. The 4Pi-STED -микроскоп является результатом объединения двух не связанных между собой концепций: микроскопии со стимулированным излучением (STED) и 4Pi-микроскопии. Здесь образец флуоресцентного помещается в общий фокус двух противоположных линз, но возбуждение и обнаружение выполняются через одиночный объектив (режим 4Pi A). За зеленым импульсом возбуждения сразу следует красный STED-импульс, который попадает в фокальную область через обе линзы, вызывая стимулированное излучение возбужденных флуоресцентных молекул в основное состояние. Чтобы разрешить флуоресцентное излучение из центра, но подавить его из соседних областей, полезно сдвиг фазы пучка STED, чтобы он имел минимум в центре.
.